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公开(公告)号：CN114277045A
公开(公告)日：2022-04-05
申请号：CN202111466694.4
申请日：2021-12-03
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酰胺化合物生物传感器的构建及其应用，属于生物工程技术领域。本发明提供了一段AmiC‑AmiR突变体的氨基酸基序在检测酰胺类化合物中的应用。本发明通过对RBS进行优化、并将AmiC第83位取代为组氨酸，从而实现了此传感器对于酰胺类物质的响应，并且能检测到摩尔级别的含量，响应范围在0～10mM之间。从而具备良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN113817659A
公开(公告)日：2021-12-21
申请号：CN202111076165.3
申请日：2021-09-14
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/21 , C12N15/70 , C12N15/64 , C12N15/60 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/31 , C12P13/06 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种代谢工程改造大肠杆菌发酵制备β‑丙氨酸的方法，属于生物工程领域。本发明构建了一种工程菌株，通过游离型表达质粒分别过表达panD基因、aspA基因、大肠杆菌来源的ppc基因、gldA基因和dhaKLM基因，敲除了染色体上的lacI基因、乙醛羧酸循环抑制子iclR和富马酸消耗途径的fumA和fumC基因获得高效生产β‑丙氨酸的重组菌。该重组菌株能够以廉价的甘油为底物，发酵生成附加值更高的β‑丙氨酸，发酵50h，β‑丙氨酸产量可达37.9g/L，为工业绿色、高效生产β‑丙氨酸提供了技术支持。
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公开(公告)号：CN111269926B
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN201911414867.0
申请日：2019-12-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种钴离子诱导型蛋白表达系统及应用，属于生物工程技术领域。本发明通过将响应钴离子的阻遏蛋白RcnR及其操纵序列rcnO与来源于枯草芽孢杆菌的强启动子Pveg构建在一起，得到了钴离子诱导型高效基因表达系统。当利用该系统表达腈水合酶时，以500μM钴离子作为诱导剂，酶活最高达到106.2±4.6U/mL，接近使用IPTG诱导系统的水平(121.4±4.0U/mL)。在利用该钴离子诱导型系统表达腈水合酶过程中，钴离子同时作为腈水合酶的诱导剂和金属配体，不需要额外添加化学诱导剂，降低了生产成本，简化了生产工艺。
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公开(公告)号：CN112553235A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011449022.8
申请日：2020-12-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种甘油诱导表达系统及在纳豆激酶生产中的应用，属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明通过将PglpD与抗终止子GlpP共同构建至枯草芽孢杆菌高拷贝质粒上，使菌体的生长和蛋白的表达分开。在发酵初期，使菌体充分利用葡萄糖等优先利用的碳源完成生长和高效积累生物量的过程；直至葡萄糖耗尽，甘油自动诱导开始之后，蛋白得到高效表达。本发明用绿色荧光蛋白和纳豆激酶验证该表达系统的调控性能，该表达系统可广泛应用于对宿主菌压力较大的蛋白和代谢产物的生产上。
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公开(公告)号：CN112322606A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011307426.3
申请日：2020-11-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种腈水合酶突变体及其应用，属于基因工程和酶工程领域。本发明提供的腈水合酶突变体Str.t NHase‑βL48D在65℃的半衰期大约是43分钟，相比其他NHase酶热稳定性有显著提高。采用本发明的技术方案，对于以烟腈、丙烯腈、苯甲腈、2‑氰基吡嗪腈、异丁腈、正戊腈、肉桂腈等腈类化合物为底物的反应，其底物耐受性得到了明显的提高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111607623A
公开(公告)日：2020-09-01
申请号：CN202010479232.5
申请日：2020-05-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种代谢工程改造大肠杆菌制备α-酮异戊酸的方法，属于生物工程领域。本发明构建了一种偶联表达乙酰乳酸合成酶、乙酰乳酸异构还原酶和二羟基酸脱水酶的重组菌株，并对该宿主菌株进行改造优化，获得能够发酵法高效生产α-酮异戊酸的重组菌。该重组菌株能够以廉价的葡萄糖为底物，发酵生成附加值更高的α-酮异戊酸，发酵36h，α-酮异戊酸产量可达22.91g/L，葡萄糖转化率达80％。
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公开(公告)号：CN111019964A
公开(公告)日：2020-04-17
申请号：CN201911421812.2
申请日：2019-12-31
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种改造钴内稳态减少腈水合酶生产中钴用量的方法，属于基因工程和发酵工程技术领域。本发明所述方法中使用的Co2+内稳态系统是通过引入外排蛋白RcnA和摄取蛋白NiCoT构建而成的。在人工Co2+内稳态的帮助下，大肠杆菌对于高浓度的Co2+耐受性增强，同时使用型诱导系统表达外源基因时，蛋白可被更低浓度的Co2+有效诱导。将该系统应用于腈水合酶生产时，达到最大酶活的Co2+使用量从500μM降低至300μM，在腈水合酶的酶活和产量不变的基础上，可以显著降低Co2+的使用量，降低了生产成本，减少了生产过程中对环境的潜在污染。
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公开(公告)号：CN118185895B
公开(公告)日：2024-10-01
申请号：CN202311766841.9
申请日：2023-12-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种细菌来源的蔗糖合酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明的野生型纯酶的比酶活为7.61±0.84U/mg，突变体G632D/K633R的比酶活达55.41±0.75U/mg，相对野生型比酶活提高7.28倍。突变体G632D/K633R在55℃处理30分钟后仍有42％以上的残留酶活性，相同处理条件下野生型只剩余12％。相比野生型酶，该突变体酶G632D/K633R的比酶活和热稳定性都有很明显的提高，有利于实现UDPG的低成本生成，进而为活性糖类物质，如莱鲍迪苷D等的生物合成提供廉价易得的底物原料。
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公开(公告)号：CN118185895A
公开(公告)日：2024-06-14
申请号：CN202311766841.9
申请日：2023-12-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种细菌来源的蔗糖合酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明的野生型纯酶的比酶活为7.61±0.84U/mg，突变体G632D/K633R的比酶活达55.41±0.75U/mg，相对野生型比酶活提高7.28倍。突变体G632D/K633R在55℃处理30分钟后仍有42％以上的残留酶活性，相同处理条件下野生型只剩余12％。相比野生型酶，该突变体酶G632D/K633R的比酶活和热稳定性都有很明显的提高，有利于实现UDPG的低成本生成，进而为活性糖类物质，如莱鲍迪苷D等的生物合成提供廉价易得的底物原料。
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公开(公告)号：CN114790452B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202210399511.X
申请日：2020-11-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种对腈类化合物具有高稳定性的腈水合酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明提供的腈水合酶突变体Str.t NHase‑βL48D在65℃的半衰期大约是43分钟，相比其他NHase酶热稳定性有显著提高。采用本发明的技术方案，对于以烟腈、丙烯腈、苯甲腈、2‑氰基吡嗪腈、异丁腈、正戊腈、肉桂腈等腈类化合物为底物的反应，其底物耐受性得到了明显的提高。
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