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公开(公告)号：CN116574768A
公开(公告)日：2023-08-11
申请号：CN202310144165.5
申请日：2023-02-21
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司 , 浙江工业大学 , 浙江渚隆生物科技有限公司
IPC分类号： C12P17/18
摘要： 本发明涉及药物合成领域，公开了一种一锅酶法制备L‑5‑MTHF的方法。本发明提供方法通过往叶酸中加入二氢叶酸还原酶、四氢叶酸甲基转移酶，使叶酸在二氢叶酸还原酶(DHFR)的催化下，发生不对称加氢反应，得到中间体化合物L‑四氢叶酸，后经四氢叶酸甲基转移酶(DmdA)催化得到具有光学纯的L‑5‑MTHF。本发明一锅酶法可以避免中间产物分离的步骤，同时，产生的中间体现时转化为产物L‑5‑MTHF，即产即用，避免了产物抑制的问题。本发明方法制备L‑5‑MTHF具有高产率，有极大的应用价值和市场前景。
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公开(公告)号：CN114480525B
公开(公告)日：2024-06-07
申请号：CN202210011841.7
申请日：2022-01-06
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司 , 浙江新银象生物工程有限公司
IPC分类号： C12P17/18 , C12N1/21 , C07D495/04 , C12R1/38
摘要： 本发明涉及一种提高D‑生物素产量的生产方法，属于生物技术领域。本发明公开了一种提高D‑生物素产量的生产方法，该方法是采用易变假单胞菌(Pseudomonas mutabilis)基因工程菌，以葡萄糖和甘油为复合碳源，并采用两阶段或三阶段控温策略，结合乙醇补料工艺进行D‑生物素的快速发酵生产，较原始工艺产量提高了21％‑170％，周期缩短了13％‑28％。本发明提供了一种简便、安全、高效的D‑生物素发酵生产方法，改变了已有生产工艺步骤，显著提高了D‑生物素的生产强度，不仅缩短了发酵周期，节约了成本，而且减少了发酵废液和废气的排放，减轻环境污染，另外，工艺简单易放大，易于实现工业化生产。
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公开(公告)号：CN112176010B
公开(公告)日：2022-09-30
申请号：CN201910585879.3
申请日：2019-07-01
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种促进生物素合成的方法，促进生物素合成的重组细胞和基因工程菌，该方法通过引入枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168)来源的编码庚二酸辅酶A合成酶基因bioW和能够裂解长链脂肪酰基‑ACP的P450氧化酶基因bioI来强化生物素前体庚二酸硫酯的供应，促进下游生物素合成基因bioAFDB对生物素的合成。通过本发明，获得的工程菌生物素合成能力得到了极大的提升，在添加少量庚二酸的情况下，上罐分批发酵产生了80mg/L生物素，其产量是野生型易变假单胞菌的8000倍。
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公开(公告)号：CN112175983A
公开(公告)日：2021-01-05
申请号：CN201910591872.2
申请日：2019-07-01
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种促进生物素合成的方法、促进生物素合成的重组细胞和基因工程菌，该方法将枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168)生物素合成操纵子bioWAFDBI中各个生物素合成基因bioW、bioA、bioF、bioD、bioB和bioI单独克隆并重新进行排列组合，其中，基因bioF、bioA、bioD和bioB可以来自其他含有相应基因的微生物。通过强启动子过表达上述重排的生物素合成基因簇，包含这些顺序的载体能够转化到其他微生物中，尤其是易变假单胞菌。通过本发明，获得的工程菌生物素合成能力得到了极大的提升，在添加庚二酸的情况下，上罐补料分批发酵产生了272mg/L生物素，其产量是野生型易变假单胞菌的27200倍。
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公开(公告)号：CN112176010A
公开(公告)日：2021-01-05
申请号：CN201910585879.3
申请日：2019-07-01
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司
摘要： 本发明公开了一种促进生物素合成的方法，促进生物素合成的重组细胞和基因工程菌，该方法通过引入枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168)来源的编码庚二酸辅酶A合成酶基因bioW和能够裂解长链脂肪酰基‑ACP的P450氧化酶基因bioI来强化生物素前体庚二酸硫酯的供应，促进下游生物素合成基因bioAFDB对生物素的合成。通过本发明，获得的工程菌生物素合成能力得到了极大的提升，在添加少量庚二酸的情况下，上罐分批发酵产生了80mg/L生物素，其产量是野生型易变假单胞菌的8000倍。
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公开(公告)号：CN114480525A
公开(公告)日：2022-05-13
申请号：CN202210011841.7
申请日：2022-01-06
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司 , 浙江新银象生物工程有限公司
IPC分类号： C12P17/18 , C12N1/21 , C07D495/04 , C12R1/38
摘要： 本发明涉及一种提高D‑生物素产量的生产方法，属于生物技术领域。本发明公开了一种提高D‑生物素产量的生产方法，该方法是采用易变假单胞菌(Pseudomonas mutabilis)基因工程菌，以葡萄糖和甘油为复合碳源，并采用两阶段或三阶段控温策略，结合乙醇补料工艺进行D‑生物素的快速发酵生产，较原始工艺产量提高了21％‑170％，周期缩短了13％‑28％。本发明提供了一种简便、安全、高效的D‑生物素发酵生产方法，改变了已有生产工艺步骤，显著提高了D‑生物素的生产强度，不仅缩短了发酵周期，节约了成本，而且减少了发酵废液和废气的排放，减轻环境污染，另外，工艺简单易放大，易于实现工业化生产。
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公开(公告)号：CN111057661A
公开(公告)日：2020-04-24
申请号：CN201911131411.3
申请日：2019-11-19
申请人： 浙江圣达生物药业股份有限公司
摘要： 本发明涉及25-羟基维生素D3生产菌株及其筛选方法与应用，属于生物工程技术领域。所述25-羟基维生素D3生产菌株的保藏编号为：CCTCC M 2019385，保藏日期为：2019年5月23日。上述菌株可应用于高效转化底物维生素D3合成25-羟基维生素D3。经本发明筛选出的菌株转化维生素D3效率高，易培养，易于工业化放大。
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公开(公告)号：CN110903991A
公开(公告)日：2020-03-24
申请号：CN201911103534.6
申请日：2019-11-13
申请人： 浙江新银象生物工程有限公司 , 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种含高拷贝数人源溶菌酶基因的重组毕赤酵母工程菌及其应用，所述重组毕赤酵母工程菌是将SEQ ID NO.1所示溶菌酶基因以高拷贝数整合毕赤酵母基因组而获得。本发明采用两种质粒介导的重组菌构建方法，得到拷贝数为15的重组菌；重组菌产溶菌酶酶活高，120-140h内发酵酶活180-220KU/mL。
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公开(公告)号：CN106749564A
公开(公告)日：2017-05-31
申请号：CN201611115118.4
申请日：2016-12-07
申请人： 浙江新银象生物工程有限公司 , 浙江工业大学
IPC分类号： C07K14/315 , C07K1/36 , C07K1/34 , C07K1/30
CPC分类号： C07K14/315
摘要： 本发明提供了一种膜技术结合结晶法分离制备高纯Nisin的方法：取Nisin发酵液，调节pH至2.0～3.0，加热至70～80℃保持30～45min，之后经陶瓷膜固液分离，取滤液先用截留分子量7000～8000的超滤膜进行除杂，再用截留分子量2000～2500的超滤膜进行浓缩，接着于45～55℃下继续真空浓缩，得到浓缩液；取所得浓缩液，在50～60℃下，加入有机溶剂搅拌均匀，调节pH至5.0～7.0，降温至0～4℃结晶12～18h，之后收集结晶所得晶体，真空干燥，制得成品；本发明方法生产过程环保经济，可制备含量高达99％以上的高纯Nisin，该产品可广泛应用于食品、医疗、卫生行业。
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公开(公告)号：CN115786137A
公开(公告)日：2023-03-14
申请号：CN202211504379.0
申请日：2022-11-28
申请人： 浙江工业大学
摘要： 本发明公开了一种中国被毛孢固体培养基及其制备方法和应用，解决中国被毛孢产孢少，培养周期较长的问题。固体培养基成分主要由玉米浸粉、可溶性淀粉、琼脂粉、水分组成。本发明的有益之处在于：本发明提供的中国被毛孢固体培养基及其培养方法，能够促进中国被毛孢固体培养的芽生孢子生长速率，并且固体培养基原料易得，成本低，制作方法简便，制作方法要求低，适于推广使用。
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