公开(公告)号：US20110281301A1

公开(公告)日：2011-11-17

申请号：US12742299

申请日：2008-10-06

申请人： Hitto Kaufmann ,  Eric Becker ,  Lore Florin ,  Barbara Enenkel ,  Kerstin Sautter ,  Rebecca Bischoff

发明人： Hitto Kaufmann ,  Eric Becker ,  Lore Florin ,  Barbara Enenkel ,  Kerstin Sautter ,  Rebecca Bischoff

IPC分类号： C12P21/00 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85

CPC分类号： C12N5/0018 ,  C07K16/00 ,  C12N2501/48 ,  C12N2501/60 ,  C12N2510/02

摘要： The invention concerns the field of protein production and cell culture technology. It describes a method of producing a heterologous protein of interest in a cell comprising a. Increasing the expression or activity of a secretion enhancing gene, and b. Increasing the expression or activity of an anti-apoptotic gene, and c. Effecting the expression of said protein of interest, whereby the secretion enhancing gene is a gene encoding a protein whose expression or activity is induced during one of the following cellular processes: plasma-cell differentiation, unfolded protein response (UPR), endoplasmic reticulum overload response (EOR).

摘要翻译： 本发明涉及蛋白质生产和细胞培养技术领域。 它描述了在包含a的细胞中产生感兴趣的异源蛋白质的方法。 增加分泌增强基因的表达或活性，b。 增加抗凋亡基因的表达或活性，c。 影响所述目的蛋白质的表达，由此分泌增强基因是编码在以下细胞过程之一期间诱导其表达或活性的蛋白质的基因：血浆细胞分化，展开的蛋白质应答（UPR），内质网过载反应 （EOR）。

公开(公告)号：US20120190065A1

公开(公告)日：2012-07-26

申请号：US13320364

申请日：2010-05-12

申请人： Lore Florin ,  Barbara Enenkel ,  Martin Fussenegger ,  Hitto Kaufmann ,  Raffaella Santoro

发明人： Lore Florin ,  Barbara Enenkel ,  Martin Fussenegger ,  Hitto Kaufmann ,  Raffaella Santoro

IPC分类号： C12P21/00 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85

CPC分类号： C12N15/63 ,  C12N15/113 ,  C12N15/67 ,  C12N2310/14 ,  C12N2310/141 ,  C12P21/02

摘要： The invention concerns the field of cell culture technology. It concerns production host cell lines with increased expression of ribosomal RNA (rRNA) achieved through introduction of nucleic acids encoding UBF or reducing expression of NoRC proteins, especially of TIP-5. Those cell lines have improved secretion and growth characteristics in comparison to control cell lines. The invention further concerns a method of producing proteins using the cells generated by the described method.

摘要翻译： 本发明涉及细胞培养技术领域。 它涉及通过引入编码UBF的核酸或减少NoRC蛋白，特别是TIP-5的表达而实现的核糖体RNA（rRNA）表达增加的生产宿主细胞系。 与对照细胞系相比，这些细胞系具有改善的分泌和生长特性。 本发明还涉及使用由所述方法产生的细胞产生蛋白质的方法。

公开(公告)号：US08597909B2

公开(公告)日：2013-12-03

申请号：US13062781

申请日：2009-09-09

申请人： Lore Florin ,  Rebecca Bischoff ,  Juergen Fieder ,  Hitto Kaufmann ,  Thomas Krieg

发明人： Lore Florin ,  Rebecca Bischoff ,  Juergen Fieder ,  Hitto Kaufmann ,  Thomas Krieg

IPC分类号： C12P21/06

CPC分类号： C12N5/0037 ,  C12N2500/30 ,  C12N2502/99 ,  C12N2510/02

摘要： The present invention refers to the area of cell culture technology and relates to methods for multiplying/cloning cells, preferably cell lines, which are important to the production of biopharmaceuticals. The invention further relates to methods for manufacturing proteins and to the use of cells extracted and multiplied through single cell sorting and to media compositions that enable a multiplication of single cells. Through the use of albumin-producing, preferably HSA-producing, cells as feeder cells for the conditioning of medium or as host cells, the recloning efficiency and thereby the quantity of clones obtained can be significantly increased. A combination of these approaches is also possible. Through the use of albumin-producing, preferably HSA-producing, cells, an increase in the recloning efficiency can be achieved in serum-free and/or insulin-free medium as well, and in different cell types.

摘要翻译： 本发明涉及细胞培养技术的领域，涉及对生物药物生产重要的细胞，优选细胞系的繁殖/克隆方法。 本发明还涉及用于制造蛋白质的方法以及使用通过单细胞分选提取和倍增的细胞以及能够使单细胞增殖的培养基组合物的方法。 通过使用生产白蛋白，优选产生HSA的细胞作为培养基或宿主细胞调节的饲养细胞，可以显着提高获得的克隆效率，从而获得克隆的量。 这些方法的组合也是可能的。 通过使用产生白蛋白，优选产生HSA的细胞，可以在无血清和/或不含胰岛素的培养基以及不同细胞类型中实现再生能力的提高。

公开(公告)号：US20110262967A1

公开(公告)日：2011-10-27

申请号：US13062781

申请日：2009-09-09

申请人： Lore Florin ,  Rebecca Bischoff ,  Juergen Fieder ,  Hitto Kaufmann ,  Thomas Krieg

发明人： Lore Florin ,  Rebecca Bischoff ,  Juergen Fieder ,  Hitto Kaufmann ,  Thomas Krieg

IPC分类号： C12P21/00 ,  C12N5/071

CPC分类号： C12N5/0037 ,  C12N2500/30 ,  C12N2502/99 ,  C12N2510/02

摘要： The present invention refers to the area of cell culture technology and relates to methods for multiplying/cloning cells, preferably cell lines, which are important to the production of biopharmaceuticals. The invention further relates to methods for manufacturing proteins and to the use of cells extracted and multiplied through single cell sorting and to media compositions that enable a multiplication of single cells. Through the use of albumin-producing, preferably HSA-producing, cells as feeder cells for the conditioning of medium or as host cells, the recloning efficiency and thereby the quantity of clones obtained can be significantly increased. A combination of these approaches is also possible. Through the use of albumin-producing, preferably HSA-producing, cells, an increase in the recloning efficiency can be achieved in serum-free and/or insulin-free medium as well, and in different cell types.

摘要翻译： 本发明涉及细胞培养技术的领域，涉及对生物药物生产重要的细胞，优选细胞系的繁殖/克隆方法。 本发明还涉及用于制造蛋白质的方法以及使用通过单细胞分选提取和倍增的细胞以及能够使单细胞增殖的培养基组合物的方法。 通过使用生产白蛋白，优选产生HSA的细胞作为培养基或宿主细胞调节的饲养细胞，可以显着提高获得的克隆效率，从而获得克隆的量。 这些方法的组合也是可能的。 通过使用产生白蛋白，优选产生HSA的细胞，可以在无血清和/或不含胰岛素的培养基以及不同细胞类型中实现再生能力的提高。

公开(公告)号：US20080300207A1

公开(公告)日：2008-12-04

申请号：US12040198

申请日：2008-02-29

申请人： Hitto Kaufmann ,  Lore Florin ,  Eric Becker ,  Monilola Olayioye ,  Angelika Hausser ,  Tim Fugmann

发明人： Hitto Kaufmann ,  Lore Florin ,  Eric Becker ,  Monilola Olayioye ,  Angelika Hausser ,  Tim Fugmann

IPC分类号： A61K31/70 ,  C12P21/04 ,  C12N5/06 ,  C12N15/00 ,  C12N1/19 ,  A61P31/00 ,  C12Q1/02 ,  C12N5/04 ,  C07K7/00 ,  C07K16/18

CPC分类号： C12N15/63 ,  C07K14/435 ,  C07K14/47 ,  C07K14/4702 ,  C07K16/00 ,  C07K2319/036 ,  C12N15/67 ,  C12N15/85 ,  C12P21/00 ,  C12Q1/68 ,  G01N33/68

摘要： The invention concerns the field of protein production and cell culture technology. CERT is identified as a novel in vivo PKD substrate. Phosphorylation on serine 132 by PKD decreases the affinity of CERT towards its lipid target phosphatidylinositol 4-phosphate at Golgi membranes and reduces ceramide transfer activity, identifying PKD as a regulator of lipid homeostasis. The present invention shows that CERT in turn is critical for PKD activation and PKD dependent protein cargo transport to the plasma membrane. The interdependence of PKD and CERT is thus a key to the maintenance of Golgi membrane integrity and secretory transport.

摘要翻译： 本发明涉及蛋白质生产和细胞培养技术领域。 CERT被确定为体内PKD底物的新颖。 通过PKD在丝氨酸132上的磷酸化降低了CERT对高尔基体膜上的脂质靶磷脂酰肌醇4-磷酸的亲和力，降低了神经酰胺转移活性，鉴定了PKD作为脂质体内平衡的调节剂。 本发明显示CERT又对于PKD激活和PKD依赖蛋白质运送到质膜的关键。 因此，PKD和CERT的相互依存关系是维持高尔基体膜完整性和分泌转运的关键。

公开(公告)号：US08535940B2

公开(公告)日：2013-09-17

申请号：US12524219

申请日：2008-01-22

申请人： Hitto Kaufmann ,  Lore Florin ,  Eric Becker

发明人： Hitto Kaufmann ,  Lore Florin ,  Eric Becker

IPC分类号： A61K39/395 ,  C12N5/10 ,  A61P35/00 ,  C12P21/00

CPC分类号： C12N5/0602 ,  C12N9/003 ,  C12N2501/70 ,  C12N2501/998 ,  C12N2510/02

摘要： The invention concerns the field of cell culture technology. It concerns a method of improving cell growth, especially the growth of biopharmaceutical producer host cells. The invention further concerns a method of producing proteins using the cells generated by the described method.

摘要翻译： 本发明涉及细胞培养技术领域。 它涉及改善细胞生长的方法，特别是生物制药生产者宿主细胞的生长。 本发明还涉及使用由所述方法产生的细胞产生蛋白质的方法。

公开(公告)号：US20130177919A1

公开(公告)日：2013-07-11

申请号：US12528828

申请日：2008-02-29

申请人： Hitto Kaufmann ,  Lore Florin ,  Eric Becker ,  Monilola Olayioye ,  Angelika Hausser ,  Tim Fugmann

发明人： Hitto Kaufmann ,  Lore Florin ,  Eric Becker ,  Monilola Olayioye ,  Angelika Hausser ,  Tim Fugmann

IPC分类号： C12N15/85 ,  G01N33/68 ,  C12Q1/68 ,  C07K14/47 ,  C12P21/00

CPC分类号： C12N15/63 ,  C07K14/435 ,  C07K14/47 ,  C07K14/4702 ,  C07K16/00 ,  C07K2319/036 ,  C12N15/67 ,  C12N15/85 ,  C12P21/00 ,  C12Q1/68 ,  G01N33/68

摘要： The invention concerns the field of protein production and cell culture technology. CERT is identified as a novel in vivo PKD substrate. Phosphorylation on serine 132 by PKD decreases the affinity of CERT towards its lipid target phosphatidylinositol 4-phosphate at Golgi membranes and reduces ceramide transfer activity, identifying PKD as a regulator of lipid homeostasis. The present invention shows that CERT in turn is critical for PKD activation and PKD dependent protein cargo transport to the plasma membrane. The interdependence of PKD and CERT is thus a key to the maintenance of Golgi membrane integrity and secretory transport.

公开(公告)号：US20120100553A1

公开(公告)日：2012-04-26

申请号：US13318509

申请日：2010-05-04

申请人： Lore Florin ,  Eric Becker ,  Hitto Kaufmann

发明人： Lore Florin ,  Eric Becker ,  Hitto Kaufmann

IPC分类号： C12N5/10 ,  C12P21/00 ,  C12Q1/68

CPC分类号： C07K14/47

摘要： The invention concerns the field of cell culture technology. The invention describes production host cell lines comprising vector constructs comprising a CERT S132 A expression cassette. Those cell lines have improved growth characteristics and high CERT S132A expression levels. The invention especially concerns two cell lines deposited with the DSMZ under the number DSM ACC2989 (CHO/CERT 2.20) and DSM AC-C2990 (CHO/CERT 2.41). The invention further concerns a method of generating such preferred production host cells and a method of producing proteins using the two cell lines deposited with the DSMZ under the number DSM ACC2989 (CHO/CERT 2.20) and DSM ACC2990 (CHO/CERT 2.41).

摘要翻译： 本发明涉及细胞培养技术领域。 本发明描述了包含载体构建体的生产宿主细胞系，其包含CERT S132A表达盒。 这些细胞系具有改善的生长特性和较高的CERT S132A表达水平。 本发明特别涉及以DSM ACC2989（CHO / CERT 2.20）和DSM AC-C2990（CHO / CERT 2.41）存放于DSMZ的两种细胞系。 本发明还涉及产生这种优选的生产宿主细胞的方法，以及使用保藏在帝斯曼数据DSM ACC2989（CHO / CERT 2.20）和DSM ACC2990（CHO / CERT 2.41）上的DSMZ的两种细胞系产生蛋白质的方法。

公开(公告)号：US08962312B2

公开(公告)日：2015-02-24

申请号：US12507252

申请日：2009-07-22

申请人： Hitto Kaufmann ,  Lore Florin ,  Eric Becker ,  Joey M. Studts

发明人： Hitto Kaufmann ,  Lore Florin ,  Eric Becker ,  Joey M. Studts

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12P21/02 ,  C07K16/00 ,  C12N9/06 ,  C12N15/63

CPC分类号： C12P21/02 ,  C07K16/00 ,  C12N9/003

摘要： The invention concerns the field of cell culture technology. The invention describes production host cell lines comprising vector constructs comprising a DHFR expression cassette. Those cell lines have improved growth characteristics in comparison to DHFR-deficient or DHFR-reduced cell lines such as CHO DG44 and CHO DUKX-B11. The invention especially concerns two cell lines, a representative of each cell line is deposited with the DSMZ under the number DSM ACC2909 (CHOpper® Discovery) and DSM ACC2910 (CHOpper® Standard). The invention further concerns a method of producing proteins using the cells generated by the described method.

摘要翻译： 本发明涉及细胞培养技术领域。 本发明描述了包含载体构建体的生产宿主细胞系，其包含DHFR表达盒。 与DHFR缺陷型或DHFR降低的细胞系如CHO DG44和CHO DUKX-B11相比，这些细胞系具有改善的生长特性。 本发明特别涉及两种细胞系，每种细胞系的代表以DSM ACC2909（发现）和DSM ACC2910（标准品）的形式存放于DSMZ。 本发明还涉及使用由所述方法产生的细胞产生蛋白质的方法。

公开(公告)号：US09340592B2

公开(公告)日：2016-05-17

申请号：US13318509

申请日：2010-05-04

申请人： Lore Florin ,  Eric Becker ,  Hitto Kaufmann

发明人： Lore Florin ,  Eric Becker ,  Hitto Kaufmann

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/63 ,  A61K31/711 ,  C12P21/08 ,  C07K14/47

CPC分类号： C07K14/47

摘要： The invention concerns the field of cell culture technology. The invention describes production host cell lines comprising vector constructs comprising a CERT S132 A expression cassette. Those cell lines have improved growth characteristics and high CERT S132A expression levels. The invention especially concerns two cell lines deposited with the DSMZ under the number DSM ACC2989 (CHO/CERT 2.20) and DSM AC-C2990 (CHO/CERT 2.41). The invention further concerns a method of generating such preferred production host cells and a method of producing proteins using the two cell lines deposited with the DSMZ under the number DSM ACC2989 (CHO/CERT 2.20) and DSM ACC2990 (CHO/CERT 2.41).

摘要翻译： 本发明涉及细胞培养技术领域。 本发明描述了包含载体构建体的生产宿主细胞系，其包含CERT S132A表达盒。 这些细胞系具有改善的生长特性和较高的CERT S132A表达水平。 本发明特别涉及以DSM ACC2989（CHO / CERT 2.20）和DSM AC-C2990（CHO / CERT 2.41）存放于DSMZ的两种细胞系。 本发明还涉及产生这种优选的生产宿主细胞的方法，以及使用保藏在帝斯曼数据DSM ACC2989（CHO / CERT 2.20）和DSM ACC2990（CHO / CERT 2.41）上的DSMZ的两种细胞系产生蛋白质的方法。