公开(公告)号：US6068995A

公开(公告)日：2000-05-30

申请号：US666435

申请日：1996-09-19

申请人： Kaoru Kobayashi ,  Kenji Tomomitsu ,  Shinobu Kuwae ,  Tomoshi Ohya ,  Toyoo Ohda ,  Takao Ohmura

发明人： Kaoru Kobayashi ,  Kenji Tomomitsu ,  Shinobu Kuwae ,  Tomoshi Ohya ,  Toyoo Ohda ,  Takao Ohmura

IPC分类号： C07K14/765 ,  C12N1/19 ,  C12N1/38 ,  C12N15/00 ,  C12N15/12 ,  C12N15/18 ,  C12P21/00

CPC分类号： C12N15/00 ,  C07K14/765 ,  C12N1/38 ,  C12P21/00

摘要： A method for producing a desired protein, which comprises growing, by a fed-batch culture, a host cell capable of expressing the desired protein, wherein the specific growth rate of the host cell is changed from the initial rate to a predetermined one by successively changing the rate of addition of a substrate which controls the growth of the host cell. According to the mode of change of the rate of substrate addition to the medium of the present invention, optimal patterns of specific growth rate .mu. and specific production rate .rho. can be realized to optimize the fed-batch culture system. As a consequence of the realization, it is made possible to perform a high density culture of the host cell by fed-batch culture, an the desired protein can be produced efficiently in a short time.

摘要翻译： PCT No.PCT / JP95 / 02186 Sec。 371日期1996年9月19日 102（e）1996年9月19日PCT 1994年10月25日PCT公布。 公开号WO96 / 12816 PCT 日期：1996年5月2日一种生产所需蛋白质的方法，其包括通过补料分批培养物生长能够表达所需蛋白质的宿主细胞，其中所述宿主细胞的比生长速率从初始速率改变为 通过依次改变控制宿主细胞生长的底物的加入速度来预定的。 根据本发明介质的底物添加速度的变化方式，可以实现比生长速度mu和比生产率rho的最佳模式，以优化补料分批培养体系。 作为实现的结果，可以通过补料分批培养进行宿主细胞的高密度培养，可以在短时间内有效地产生所需的蛋白质。

公开(公告)号：US5691451A

公开(公告)日：1997-11-25

申请号：US329176

申请日：1994-10-26

申请人： Tomoshi Ohya ,  Toyoo Ohda ,  Shinobu Kuwae ,  Kenji Tomomitsu ,  Kaoru Kobayashi ,  Takao Ohmura

发明人： Tomoshi Ohya ,  Toyoo Ohda ,  Shinobu Kuwae ,  Kenji Tomomitsu ,  Kaoru Kobayashi ,  Takao Ohmura

IPC分类号： A61K9/08 ,  A61K38/16 ,  A61L2/00 ,  C07K14/765 ,  C07K1/00 ,  C12P21/06

CPC分类号： C07K14/765 ,  A61L2/0023

摘要： A recombinant human serum albumin (rHSA) pharmaceutical preparation is sterilized by subjecting a pharmaceutical preparation of rHSA obtained by gene manipulation techniques packed in a container in an administration unit to heat treatment at 50.degree. to 80.degree. C. for 30 minutes or more. By the disclosed method, rHSA having high safety can be provided since microorganisms contaminated in rHSA pharmaceutical preparations die as a result of the sterilization method of the present invention.

摘要翻译： 重组人血清白蛋白（rHSA）药物制剂通过使包装在给药单元的容器中的基因操作技术获得的rHSA药物制剂在50℃至80℃下加热处理30分钟以上而进行灭菌。 通过所公开的方法，可以提供具有高安全性的rHSA，因为由rHSA药物制剂中污染的微生物因本发明的灭菌方法而死亡。

公开(公告)号：US5612197A

公开(公告)日：1997-03-18

申请号：US442756

申请日：1995-05-17

申请人： Toyoo Ohda ,  Wataru Ohtani ,  Tomoshi Ohya ,  Shinobu Kuwae ,  Kenji Tomomitsu ,  Kaoru Kobayashi ,  Takao Ohmura

发明人： Toyoo Ohda ,  Wataru Ohtani ,  Tomoshi Ohya ,  Shinobu Kuwae ,  Kenji Tomomitsu ,  Kaoru Kobayashi ,  Takao Ohmura

IPC分类号： C12P21/00 ,  C07K14/765 ,  C12N1/19 ,  C12P21/02 ,  C12R1/84

CPC分类号： C12P21/02 ,  C07K14/765

摘要： A process for producing recombinant human serum albumin is disclosed, which comprises culturing a human serum albumin-producing host, prepared by gene manipulation techniques in a medium that contains an amino acid, preferably at least one amino acid selected from the group consisting of alanine, aspartic acid, glutamic acid, histidine, serine, tryptophan, valine, isoleucine, phenylalanine, cysteine and arginine, more preferably histidine. The process can significantly increase the yield of human serum albumin over that produced by known processes.

摘要翻译： 公开了一种生产重组人血清白蛋白的方法，其包括在含有氨基酸的培养基中培养产生人血清白蛋白的宿主，其通过基因操纵技术制备，优选至少一种选自丙氨酸， 天冬氨酸，谷氨酸，组氨酸，丝氨酸，色氨酸，缬氨酸，异亮氨酸，苯丙氨酸，半胱氨酸和精氨酸，更优选组氨酸。 该方法可以显着提高人血清白蛋白与已知方法产生的产量。

公开(公告)号：US5294699A

公开(公告)日：1994-03-15

申请号：US719443

申请日：1991-06-24

申请人： Takao Ohmura ,  Akinori Sumi ,  Wataru Ohtani ,  Naoto Fuluhata ,  Kaoru Kobayashi ,  Shinobu Kuwae ,  Hirotoshi Fukutsuka ,  Tomoshi Ohya ,  Hiroshi Morise

发明人： Takao Ohmura ,  Akinori Sumi ,  Wataru Ohtani ,  Naoto Fuluhata ,  Kaoru Kobayashi ,  Shinobu Kuwae ,  Hirotoshi Fukutsuka ,  Tomoshi Ohya ,  Hiroshi Morise

IPC分类号： A61K38/16 ,  A61K38/00 ,  B01D15/00 ,  B01D15/04 ,  C07K1/14 ,  C07K1/20 ,  C07K14/435 ,  C07K14/76 ,  C07K14/765 ,  C12N15/09 ,  C12N15/14 ,  C12N15/81 ,  C12P21/02 ,  C12R1/865 ,  C07K3/28 ,  A61K45/02

CPC分类号： C07K14/765 ,  C12N15/81 ,  A61K38/00 ,  C07K2319/02

摘要： A method of inhibiting the coloration of human serum albumin expressed by using the gene manipulation technology which method comprises separating coloring contaminants from said human serum albumin before said coloring contaminants bind to the human serum albumin.

摘要翻译： 通过使用基因操作技术抑制人血清白蛋白的着色的方法，该方法包括在所述着色污染物与人血清白蛋白结合之前从所述人血清白蛋白中分离着色污染物。

公开(公告)号：US5334512A

公开(公告)日：1994-08-02

申请号：US854841

申请日：1992-03-20

申请人： Kaoru Kobayashi ,  Shinobu Kuwae ,  Tomoshi Ooya ,  Hirotoshi Fukutsuka ,  Akinori Sumi ,  Wataru Ohtani ,  Takao Ohmura ,  Kazumasa Yokoyama

发明人： Kaoru Kobayashi ,  Shinobu Kuwae ,  Tomoshi Ooya ,  Hirotoshi Fukutsuka ,  Akinori Sumi ,  Wataru Ohtani ,  Takao Ohmura ,  Kazumasa Yokoyama

IPC分类号： C07K14/765 ,  C12N1/16 ,  C12N1/19 ,  C12N15/09 ,  C12N15/14 ,  C12P21/00 ,  C12R1/84 ,  C12N1/38 ,  C12N15/81 ,  C12P21/02

CPC分类号： C07K14/765 ,  C12N1/16

摘要： A method for producing human serum albumin which comprises cultivating a human serum albumin-producing host prepared by genetic engineering, in a medium containing a fatty acid having 10 to 26 carbon atoms, or its salt, and a method for cultivating the host. HSA production can be greatly increased by the present invention.

摘要翻译： 一种生产人血清白蛋白的方法，包括在含有10-26个碳原子的脂肪酸的培养基或其盐中培养通过基因工程制备的人血清白蛋白生产宿主及其培养方法。 通过本发明可以大大增加HSA的生产。

公开(公告)号：US5643792A

公开(公告)日：1997-07-01

申请号：US181242

申请日：1994-01-13

申请人： Ken Okabayashi ,  Takao Ohmura ,  Kazumasa Yokoyama ,  Haruhide Kawabe

发明人： Ken Okabayashi ,  Takao Ohmura ,  Kazumasa Yokoyama ,  Haruhide Kawabe

IPC分类号： C12N1/20 ,  C07K14/765 ,  C12N1/15 ,  C12N1/21 ,  C12N9/04 ,  C12N9/64 ,  C12N15/00 ,  C12N15/01 ,  C12N15/52 ,  C12N15/74 ,  C12N15/78 ,  C12N15/81 ,  C12P21/00 ,  C12R1/84 ,  C12N15/11

CPC分类号： C12N9/0006 ,  C07K14/765 ,  C12N15/52 ,  C12N15/74 ,  C12N15/78 ,  C12N15/815 ,  C12Y101/03013

摘要： A methylotrophic and glucotrophic mutant strain capable of producing a heterologous protein and a method for producing a heterologous protein, comprising culture of the mutant strain. The mutant strain of the present invention can be grown in a medium containing both methanol and glucose, with the effect that the growth of the strain and production of a heterologous protein proceed at the same time. Accordingly, a heterologous protein can be produced in a large amount in a short time.

摘要翻译： 能够产生异源蛋白质的甲基营养型和葡萄糖营养型突变菌株和产生异源蛋白质的方法，包括突变菌株的培养。 本发明的突变菌株可以在含有甲醇和葡萄糖的培养基中生长，其效果是菌株的生长和异源蛋白质的产生同时进行。 因此，可以在短时间内大量生产异源蛋白质。

公开(公告)号：US5369020A

公开(公告)日：1994-11-29

申请号：US031823

申请日：1993-03-16

申请人： Akinori Sumi ,  Wataru Ohtani ,  Naoto Furuhata ,  Kazuya Takeshima ,  Kaeko Kamide ,  Takao Ohmura ,  Kazumasa Yokoyama

发明人： Akinori Sumi ,  Wataru Ohtani ,  Naoto Furuhata ,  Kazuya Takeshima ,  Kaeko Kamide ,  Takao Ohmura ,  Kazumasa Yokoyama

IPC分类号： A61K38/16 ,  A61P7/00 ,  B01D15/00 ,  C07K14/765 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N15/09 ,  C12N15/14 ,  C12P21/00 ,  C12P21/02 ,  C12R1/84 ,  C12R1/865 ,  C12P1/02

CPC分类号： C12P21/02 ,  C07K14/765

摘要： A method for suppressing coloring of human serum albumin expressed by genetic engineering, which comprises culture and/or purification in the presence of an amine compound selected from the group consisting of alkylamines, diamines, guanidines, benzamidines, basic amino acids, and aminophenylacetic acids. According to the present invention, coloring of HSA expressed by genetic engineering can be suppressed to from one-half to one-tenth of that without treatment for coloring suppression. In addition, HSA can be recovered in high yields, and the treatment of the invention does not affect the inherent properties of HSA.

摘要翻译： 一种用于抑制由遗传工程表达的人血清白蛋白着色的方法，其包括在选自烷基胺，二胺，胍胺，苯甲脒，碱性氨基酸和氨基苯基乙酸的胺化合物存在下培养和/或纯化。 根据本发明，通过遗传工程表达的HSA的着色可以抑制在不进行着色抑制处理的情况下的一半到十分之一。 另外，HSA可以以高收率回收，本发明的处理不影响HSA的固有特性。

公开(公告)号：US5683893A

公开(公告)日：1997-11-04

申请号：US471206

申请日：1995-06-06

申请人： Hideyuki Ohi ,  Masami Miura ,  Shusei Uno ,  Masako Chuganji ,  Ryuji Hiramatsu ,  Takao Ohmura

发明人： Hideyuki Ohi ,  Masami Miura ,  Shusei Uno ,  Masako Chuganji ,  Ryuji Hiramatsu ,  Takao Ohmura

IPC分类号： C07K14/765 ,  C12N1/19 ,  C12N15/09 ,  C12N15/14 ,  C12N15/81 ,  C12P21/02 ,  C12R1/84 ,  C12P21/00 ,  C07H21/04 ,  C12N15/64

CPC分类号： C12N15/815 ,  C07K14/765

摘要： A mutant AOX2 promoter obtained by mutating a sequence of natural AOX2 promoter in a manner comprising at least one of the three mutation modes of (1) a region extending upstream from nucleotide 1187 inclusive and comprising at least nucleotides 845-960 is deleted, (2) nucleotide(s) is(are) replaced in region(s) in nucleotides 1274-1314, and (3) new oligonucleotide(s) is (are) inserted in region(s) in nucleotides 1274-1314, a vector carrying said mutant AOX2 promoter, a transformant into which said vector has been introduced, and a method for producing a heterologous protein, which comprises cultivating said transformant. The promoter of the present invention has remarkably enhanced activity as compared with natural AOX2 promoter, and is highly useful as a promoter to be carried in an expression vector allowing heterologous protein expression. In addition, the vector and the transformant of the invention can efficiently express and produce various useful heterologous proteins.

摘要翻译： 以包含以下三种突变模式中的至少一种的方式突变天然AOX2启动子的突变体AOX2启动子被缺失：（1）包含第1187位核苷酸并且至少包含核苷酸845-960的上游延伸的区域;（2） ）核苷酸在核苷酸1274-1314的区域中被替换，并且（3）将新的寡核苷酸插入到核苷酸1274-1314的区域中，载体携带所述 突变体AOX2启动子，其中引入了所述载体的转化体，以及产生异源蛋白质的方法，其包括培养所述转化体。 与天然AOX2启动子相比，本发明的启动子具有显着增强的活性，并且作为允许异源蛋白质表达的表达载体中携带的启动子是非常有用的。 此外，本发明的载体和转化体可以有效地表达和产生各种有用的异源蛋白质。

公开(公告)号：US5440018A

公开(公告)日：1995-08-08

申请号：US36387

申请日：1993-03-24

申请人： Takao Ohmura ,  Akinori Sumi ,  Wataru Ohtani ,  Naoto Fuluhata ,  Kazuya Takeshima ,  Kaeko Kamide ,  Munehiro Noda ,  Masahide Kondo ,  Syoichi Ishikawa ,  Kazuhiro Oohara ,  Kazumasa Yokoyama

发明人： Takao Ohmura ,  Akinori Sumi ,  Wataru Ohtani ,  Naoto Fuluhata ,  Kazuya Takeshima ,  Kaeko Kamide ,  Munehiro Noda ,  Masahide Kondo ,  Syoichi Ishikawa ,  Kazuhiro Oohara ,  Kazumasa Yokoyama

IPC分类号： A61K38/00 ,  C07K1/14 ,  C07K14/765 ,  C12N15/14 ,  A61K38/38 ,  C07K1/16 ,  C07K1/36

CPC分类号： C07K14/765 ,  A61K38/00

摘要： Human serum albumin obtained by gene manipulation techniques can be purified by a combination of specified steps in which a culture supernatant obtained from a human serum albumin-producing host is subjected to ultrafiltration, heat treatment, acid treatment and another ultrafiltration, followed by subsequent treatments with a cation exchanger, a hydrophobic chromatography carrier and an anion exchanger, and by salting-out to thereby obtain a pure form of human serum albumin which contains substantially no proteinous and polysaccharide contaminants, which is formulated into a pharmaceutical preparation. This process makes it possible to effeciently purify recombinant human serum albumin and to provide substantially pure human serum albumin which does not contain producer host-related substances and other contaminants and is sufficiently free from coloration.

摘要翻译： 通过基因操作技术获得的人血清白蛋白可以通过特定步骤的组合来纯化，其中将得自人血清白蛋白的宿主的培养上清液进行超滤，热处理，酸处理和另一次超滤，然后用 阳离子交换剂，疏水性色谱载体和阴离子交换剂，并通过盐析，从而获得纯的形式的人血清白蛋白，其基本上不含有配制成药物制剂的蛋白质和多糖污染物。 该方法使得可以有效地纯化重组人血清白蛋白并提供基本上纯的人血清白蛋白，其不含生产者宿主相关物质和其它污染物，并且没有着色。

公开(公告)号：US4740498A

公开(公告)日：1988-04-26

申请号：US790668

申请日：1985-10-23

申请人： Yutaka Hirao ,  Takao Ohmura ,  Kazuo Takechi ,  Tsunetaka Nakajima ,  Masayuki Nishida

发明人： Yutaka Hirao ,  Takao Ohmura ,  Kazuo Takechi ,  Tsunetaka Nakajima ,  Masayuki Nishida

IPC分类号： A61K38/16 ,  A61K9/00 ,  A61K38/39 ,  A61K47/10 ,  A61K47/26 ,  A61K47/42 ,  A61K37/04 ,  A61K35/14 ,  A61K37/02

CPC分类号： A61K47/42 ,  A61K38/39 ,  A61K47/10 ,  A61K47/26 ,  A61K9/0048

摘要： A fibronectin preparation in the form of an aqueous solution at least upon use is disclosed. The preparation contains at least one member selected from the group consisting of disaccharides, albumin and nonionic surface active agents as a stabilizer. The preparation has improved water-solubility when in use and high stability in an aqueous solution.

摘要翻译： 公开了至少使用水溶液形式的纤连蛋白制剂。 该制剂含有选自二糖，白蛋白和非离子表面活性剂作为稳定剂的至少一种。 该制剂在使用时具有改善的水溶性和在水溶液中的高稳定性。