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公开(公告)号：CN112813090B
公开(公告)日：2024-02-06
申请号：CN202011640263.0
申请日：2020-12-31
申请人： 河南省商业科学研究所有限责任公司 , 河南省科学院
摘要： 本发明涉及一种磷脂酶D的异源表达重组质粒，其构建方法包括步骤一，人工合成质粒pUC57‑STR_ORI，步骤二，人工合成质粒pUC57‑STR_PLD，步骤三，重组质粒的构建，最终得到包括Kasop*组成型强启动子，肉桂链霉菌的信号肽，链霉菌来源的磷脂酶D合成基因和ApmR抗性筛选基因的重组质粒。本发明中所得重组质粒能够在链霉菌中成功表达，启动子具有强启动作用，信号肽能够使引导新合成的蛋白质向分泌通路转移的效果良好，磷脂酶D合成基因段能够使得磷脂酶D成功表达。本发明中通过质粒合成方法合成基因的表达元件，进而形成完整的重组质粒，且质粒结构稳定，并且便于向链霉菌宿主内转移，并保证在链霉菌宿主内成功表达。
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公开(公告)号：CN114350750A
公开(公告)日：2022-04-15
申请号：CN202210032212.2
申请日：2022-01-12
申请人： 河南省商业科学研究所有限责任公司
IPC分类号： C12Q1/6806 , C12Q1/689
摘要： 本发明涉及菌株鉴定技术领域，且公开了一种样品菌株鉴定方法，包括以下步骤：S1：基因组DNA提取，首先取1.5mL的离心管，向其中加入200μL预处理液和三颗研磨珠，然后加入菌样品，放入研磨仪中研磨充分备用；S2：混合，把研磨后的原料收集起来，然后放置混合罐中，向混合罐中加入20μL Proteinase K溶液，混合均匀；S3：加入裂解液，向混合罐中加入200μL裂解液，充分混合均匀。本发明能够彻底晾干吸附在材料中残留的漂洗液，防止漂洗液影响鉴定数据，采用组织分离法，对培养的菌株进行挑选纯化，从而方便后面的鉴定工作，提高鉴定的精准度。
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公开(公告)号：CN114292417B
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202210033286.8
申请日：2022-01-12
申请人： 河南省商业科学研究所有限责任公司 , 河南省科学院
摘要： 本发明涉及杜仲胶提取技术领域，且公开了一种高效提取杜仲胶的方法，包括以下步骤：S1：土壤采样，采集杜仲林下的腐殖质土，然后备用；S2：富集培养，将取自杜仲林下的土壤加入培养基中富集细菌、嗜热菌及真菌；S3：涂布分离，富集结束后取100μL菌液利用平板涂布法将菌进行分离；S4：活化培养，将分离纯化后的菌种放入活化培养基中进行活化培养，活化培养基包括基础培养基和活化组分；S5：测定降解率。本发明能够进行实时检测，而且能够提高检测样本，控制检测时间和温度，提高测定效率，通过优化酶活条件，能够检测到菌种提取的杜仲胶的最佳效率，从而提高杜仲胶的提取效果。
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公开(公告)号：CN114292417A
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202210033286.8
申请日：2022-01-12
申请人： 河南省商业科学研究所有限责任公司 , 河南省科学院
摘要： 本发明涉及杜仲胶提取技术领域，且公开了一种高效提取杜仲胶的方法，包括以下步骤：S1：土壤采样，采集杜仲林下的腐殖质土，然后备用；S2：富集培养，将取自杜仲林下的土壤加入培养基中富集细菌、嗜热菌及真菌；S3：涂布分离，富集结束后取100μL菌液利用平板涂布法将菌进行分离；S4：活化培养，将分离纯化后的菌种放入活化培养基中进行活化培养，活化培养基包括基础培养基和活化组分；S5：测定降解率。本发明能够进行实时检测，而且能够提高检测样本，控制检测时间和温度，提高测定效率，通过优化酶活条件，能够检测到菌种提取的杜仲胶的最佳效率，从而提高杜仲胶的提取效果。
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公开(公告)号：CN112544981A
公开(公告)日：2021-03-26
申请号：CN202011581540.5
申请日：2020-12-28
申请人： 河南省商业科学研究所有限责任公司 , 河南省科学院
IPC分类号： A23L33/135 , A23L33/16 , A23L33/19 , A23L29/256 , B01J13/02
摘要： 本发明涉及一种微胶囊，具体公开一种沙棘益生菌微胶囊的制备方法，步骤如下：1）向沙棘提取液中接种益生菌，发酵培养1～3d，得到沙棘益生菌发酵液；2）将海藻酸钠溶解在水中，配制成浓度为1%～10%的海藻酸钠溶液，将乳清分离蛋白用酸液溶解，配制成浓度为3%～12%的乳清分离蛋白溶液；3）将沙棘益生菌发酵液、海藻酸钠溶液、乳清分离蛋白溶液按比例混合均匀，得到混合液；4）将步骤3）得到的混合液逐滴加入氯化钙溶液中，室温下固定20～40min，过滤，除去水相，即得沙棘益生菌微胶囊。本发明制备的沙棘益生菌微胶囊营养活性高，益生菌活菌数高，环境抗逆性强。
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公开(公告)号：CN113030471A
公开(公告)日：2021-06-25
申请号：CN202110254896.6
申请日：2021-03-09
申请人： 河南省商业科学研究所有限责任公司 , 河南省科学院
IPC分类号： G01N33/573 , G01N33/543
摘要： 本发明公开了一种酶联比色法测定磷脂酶D酶活性的优化方法，一是通过反应体系充分反应，得到待测样品溶液；二是使用全波长酶标仪对待测样品溶液进行吸光度进行检测，得到样品溶液的吸光度值；三是以氯化胆碱物质的量为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，并以样品溶液的吸光度值对照标准曲线得到对应胆碱物质的量；四是通过定义酶活并通过公式计算得到酶活数据。本发明中优化了磷脂酶D酶活性测定方法，解决了现有的酶联比色法中关于底物溶解、反应条件、终止反应、以及数据取得的问题，利用该方法测定磷脂酶D的酶活性用时短、操作简便、灵敏度高、重复性好、实用性强，并且确定了反应中所用试剂组成，有望进一步开发形成商品化试剂盒。
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公开(公告)号：CN112831446A
公开(公告)日：2021-05-25
申请号：CN202110258070.7
申请日：2021-03-09
申请人： 河南省商业科学研究所有限责任公司 , 河南省科学院
摘要： 本发明公开了一种利用基因工程链霉菌发酵获取磷脂酶D的制备方法，包括步骤一，发酵获取，通过发酵培养→降温离心→抽滤沉淀完成；步骤二，分离纯化，通过离心去液→蛋白复溶→离心去杂→超滤浓缩完成；步骤三，检测含量，包括蛋白含量检测和跑胶酶活检测。本发明利用基因工程链霉菌制备磷脂酶D的发酵方法，为磷脂酶D工业化生产提供了基础方法，为能够保证磷脂酶D制备的酶活性，同时保证磷脂酶D制备的产量，具有良好的科研成果转化基础。
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公开(公告)号：CN110623188A
公开(公告)日：2019-12-31
申请号：CN201911033911.3
申请日：2019-10-29
申请人： 西峡县森林家食品有限责任公司 , 河南省商业科学研究所有限责任公司
IPC分类号： A23L2/39 , A23L2/70 , A23L2/52 , A23L33/105
摘要： 本发明属于固体饮料技术领域，具体涉及一种制备山茱萸醇提物颗粒的方法，包括以下步骤：（1）将山茱萸干果粉与70～85%（v/v）的水醇溶液按照1g:（25～40）mL的比例混匀，制得混悬液；（2）将上述混悬液经超声提取后进行渣液分离并保留醇提滤液；（3）对醇提滤液进行大孔树脂纯化处理；（4）在纯化后的醇提滤液中加入改性大豆磷脂和α-环糊精，经搅拌均质、喷雾干燥制得山茱萸醇提物颗粒；改性大豆磷脂、α-环糊精、滤渣或山茱萸干果粉的用量比为（0.002～0.005）:（0.05～0.09）:1。本发明通过对醇提滤液进行大孔树脂吸附纯化，极大提高了山茱萸醇提物颗粒中熊果酸的含量。
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公开(公告)号：CN108835600A
公开(公告)日：2018-11-20
申请号：CN201810734515.2
申请日：2018-07-06
申请人： 河南省商业科学研究所有限责任公司
摘要： 本发明属于方便面调料加工技术领域，具体涉及一种方便面用枇杷排骨风味调味酱包，以重量份数计，枇杷果浆3~15份、山楂粉0.1~0.4份、陈皮粉0.5~1份、棕榈油30~65份、猪板油10~15份、猪肉精膏4~8份、猪骨白汤5~10份、鲜纯瘦猪肉8~15份、食盐4~12份、洋葱5~12份、姜1.5~5份、黄豆酱1~4份、酱油1.5~4份、酵母抽提物1~3份。本申请创作性的将枇杷应用于方便面酱包中，提供了一种新的枇杷排骨风味，在丰富方便面调味类型的同时，使酱包具有一定的和胃消食、助消化的作用。
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公开(公告)号：CN113030471B
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202110254896.6
申请日：2021-03-09
申请人： 河南省商业科学研究所有限责任公司 , 河南省科学院
IPC分类号： G01N33/573 , G01N33/543
摘要： 本发明公开了一种酶联比色法测定磷脂酶D酶活性的优化方法，一是通过反应体系充分反应，得到待测样品溶液；二是使用全波长酶标仪对待测样品溶液进行吸光度进行检测，得到样品溶液的吸光度值；三是以氯化胆碱物质的量为横坐标，吸光度值为纵坐标绘制标准曲线，并以样品溶液的吸光度值对照标准曲线得到对应胆碱物质的量；四是通过定义酶活并通过公式计算得到酶活数据。本发明中优化了磷脂酶D酶活性测定方法，解决了现有的酶联比色法中关于底物溶解、反应条件、终止反应、以及数据取得的问题，利用该方法测定磷脂酶D的酶活性用时短、操作简便、灵敏度高、重复性好、实用性强，并且确定了反应中所用试剂组成，有望进一步开发形成商品化试剂盒。
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