一种分析基因表达定量的方法

    公开(公告)号:CN103014137A

    公开(公告)日:2013-04-03

    申请号:CN201110283718.2

    申请日:2011-09-22

    CPC classification number: C12Q1/6809 C12Q2525/191 C12Q2535/122

    Abstract: 本发明公开了一种分析基因表达定量的方法,所述方法包括:从总RNA中纯化mRNA,制备片段化mRNA;将所述片段化mRNA逆转录制备得到cDNA,将所述cDNA纯化后制备为平末端DNA,纯化所述平末端DNA;将所述平末端DNA片段制备得到末端加“A”碱基的DNA片段;在所述末端加“A”碱基的DNA片段两端加接头序列,得到两端加接头序列的DNA片段并进行纯化,对所述两端加接头序列的DNA片段进行PCR反应,纯化PCR反应产物;对所述PCR反应产物测序;将所述测序得到的数据过滤不合格序列得到干净序列,利用短序列映射程序将所述干净序列与参考序列比对,对所述比对结果进行分析。本发明有效的实现了定量准、可重复性高、费用低、检测阈值宽、信号噪音小等优点。

    基于宏基因组16S高可变区V3的分类方法和装置

    公开(公告)号:CN102517392A

    公开(公告)日:2012-06-27

    申请号:CN201110439198.X

    申请日:2011-12-26

    Abstract: 本发明公开一种基于宏基因组16S高可变区V3的分类方法和装置。该方法包括:提取微生物样品中的DNA;对宏基因组16S rDNA的高可变区V3进行扩增,对扩增产物进行Solexa建库,同时在建库过程中通过加上带有标签序列的接头,对每个样品进行标记;将带有标签序列的不同样品进行混合,混合后使用Solexa测序工具进行测序,得到按照标签区分的原始的测序序列reads;利用reads的重叠关系组装得到高可变区V3的全长序列unique reads;对unique reads进行分类分析,以实现对微生物群体的分类。本发明的方法和装置,对微生物群体的分类准确,且大大降低了测序成本。

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