一种基于分子反向探针的测序文库构建方法和试剂

    公开(公告)号:CN105714383A

    公开(公告)日:2016-06-29

    申请号:CN201510971452.9

    申请日:2015-12-22

    IPC分类号: C40B50/06 C12Q1/68

    摘要: 本发明公开了一种基于分子反向探针的测序文库构建方法和试剂,该方法包括:用分子反向探针与变性核酸进行退火杂交,分子反向探针包括5’端的锚定序列和3’端的延伸序列以及二者之间的测序接头序列,锚定序列和延伸序列分别与变性核酸中的目标区域两端的序列反向互补;以目标区域为模板,从3’端的延伸序列开始进行聚合反应,生成目标区域的互补序列;将5’端的锚定序列与目标区域的互补序列连接形成环状核酸分子;使用核酸外切酶消化未环化的线性分子,得到含有目标区域的单链环状分子。将得到的单链环状分子进行测序,从而实现对目标区域捕获测序。本发明的方法实现将单链环状文库构建和目标区域捕获融为一体,从而大大缩减建库流程和周期。

    基于宏基因组16S高可变区V3的分类方法和装置

    公开(公告)号:CN102517392A

    公开(公告)日:2012-06-27

    申请号:CN201110439198.X

    申请日:2011-12-26

    IPC分类号: C12Q1/68 C12M1/34

    摘要: 本发明公开一种基于宏基因组16S高可变区V3的分类方法和装置。该方法包括:提取微生物样品中的DNA;对宏基因组16S rDNA的高可变区V3进行扩增,对扩增产物进行Solexa建库,同时在建库过程中通过加上带有标签序列的接头,对每个样品进行标记;将带有标签序列的不同样品进行混合,混合后使用Solexa测序工具进行测序,得到按照标签区分的原始的测序序列reads;利用reads的重叠关系组装得到高可变区V3的全长序列unique reads;对unique reads进行分类分析,以实现对微生物群体的分类。本发明的方法和装置,对微生物群体的分类准确,且大大降低了测序成本。