公开(公告)号：CN107460188A

公开(公告)日：2017-12-12

申请号：CN201710666240.9

申请日：2017-08-07

申请人： 江南大学

发明人： 许正宏 ,  史劲松 ,  董婷婷 ,  龚劲松 ,  李恒 ,  蒋敏

IPC分类号： C12N11/10 ,  C12N11/08 ,  C12N11/04 ,  C12P17/12 ,  C12R1/40

摘要： 本发明的目的在于提供一种含腈水解酶的恶臭假单胞菌Pseudomonas putida突变体mut-D3的细胞复合固定化方法及其在烟酸制备中的应用。该突变体菌株现保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.14276。本发明具体是将海藻酸钠溶液与PVA(聚乙烯醇)按照一定比例混合，作为固定材料，再与制备好的菌悬液混合，滴入预冷的固化液中进行固定；获得的固定化细胞对高浓度底物耐受性大大增强，可应用于烟酸的高效转化合成，相比于游离细胞烟酸产量提高约2倍；本发明所提供的固定化方法操作简单、成本低、固定化细胞机械强度高、且可重复利用率高，为工业生产烟酸提供了有益的方法。

公开(公告)号：CN107267433A

公开(公告)日：2017-10-20

申请号：CN201710580770.1

申请日：2017-07-17

申请人： 江南大学

发明人： 许正宏 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  张强 ,  李恒 ,  蒋敏 ,  顾炳琛

IPC分类号： C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P17/12 ,  C12R1/19

摘要： 本发明涉及一种腈水解酶组成型表达体系的构建及其在烟酸合成中的应用，属于工业生物技术领域。所述的腈水解酶组成型表达载体是通过在pET-3b质粒导入恶臭假单胞菌Pseudomonas putida腈水解酶基因编码序列构建而成，得到重组质粒pET-3b-NIT，转化至E.coli BL21(DE3)中得到无需进行体外诱导的组成型重组腈水解酶表达菌株，命名为大肠埃希氏菌Escherichia coli NIT-1，现保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保藏编号为CGMCC No.14254。进一步采用pH-stat补料策略进行精确调控以提升菌体密度和腈水解酶产量，并以大肠埃希氏菌游离细胞为催化剂，以3-氰基吡啶为底物，通过批次投料的方式进行连续转化生产烟酸。本发明提供了一种新的无需体外诱导的组成型重组腈水解酶产生菌，该重组菌可高效表达腈水解酶，生产成本低，周期短，发酵过程无需添加诱导剂，最终获得的菌体密度大，可有效催化3-氰基吡啶生产烟酸，具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN107164397A

公开(公告)日：2017-09-15

申请号：CN201710292991.9

申请日：2017-04-28

申请人： 江南大学

发明人： 史劲松 ,  许正宏 ,  周文斌 ,  龚劲松 ,  许泓瑜 ,  李恒

IPC分类号： C12N15/55 ,  C12N9/16 ,  C12N15/70 ,  C12P13/06

CPC分类号： C12N9/16 ,  C12P13/06 ,  C12Y301/04004

摘要： 本发明提供了一种基于基因挖掘方法获得的磷脂酶D及其基因编码序列与应用方法。该磷脂酶D基因全长1,614bp，编码538个氨基酸，以质粒pET28a(+)为表达载体，以大肠杆菌E.coli BL21(DE3)为表达宿主，实现了磷脂酶D的高效表达。该磷脂酶D基因的基因挖掘方法简易便捷，经挖掘获得的目标基因所构建的重组菌株经发酵诱导可以分泌磷脂酶D，该磷脂酶D的最适反应温度为60℃，最适反应pH为7.5，且Ca2+对其酶活具有较好的激活促进作用。该酶能对磷脂进行改性，催化底物磷脂酰胆碱和L‑丝氨酸合成磷脂酰丝氨酸，在食品、医药和保健行业具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN106883010A

公开(公告)日：2017-06-23

申请号：CN201710089239.4

申请日：2017-02-20

申请人： 江南大学

发明人： 许正宏 ,  史劲松 ,  陆震鸣 ,  朱青 ,  耿燕 ,  许泓瑜 ,  龚劲松 ,  钱建瑛

IPC分类号： C05G3/00 ,  C12N1/14 ,  C12N1/38 ,  A01G1/04 ,  C12R1/645

CPC分类号： C05G3/00 ,  A01G18/00 ,  C05B7/00 ,  C05G3/0064 ,  C12N1/14 ,  C12N1/38 ,  C05D5/00 ,  C05F5/002 ,  C05F11/00 ,  C05F11/08

摘要： 本发明涉及一种樟芝生长促进剂及用其快速发酵生产樟芝的方法，包括斜面培养、液态种子制备、液态发酵及固态发酵，在各发酵过程中可添加香草醛等芳香族化合物中的一种或几种的组合，从而极大地缩短发酵生产樟芝菌丝体及子实体的培养周期，提高生物活性物质樟芝三萜的含量。与目前研究报道的技术相比，本发明技术工艺简单、高效，使用了微量的生长促进剂，可以达到快速生产樟芝菌丝体及子实体的目的，发酵周期较传统方法缩短50％以上，樟芝三萜的含量提高了60％以上，降低了生产成本，具有良好的工业运用前景。

公开(公告)号：CN104473123B

公开(公告)日：2017-03-08

申请号：CN201410791485.0

申请日：2014-12-19

申请人： 江南大学 ,  江苏恒顺醋业股份有限公司

发明人： 许正宏 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  许泓瑜 ,  陆震鸣 ,  窦文芳 ,  余永建 ,  朱胜虎 ,  王婷婷

IPC分类号： A23L27/26 ,  A23L27/22 ,  A23L23/10

摘要： 本发明公开了一种蛤味调味汤块及其制备方法，调味品包括主调味料和棕榈油，主调味料包括：蛤味固体粉末70-90%，余量为蛤蜊肉末；棕榈油的添加量为15-30g/100g蛤味固体粉末。制备时，先制备蛤蜊浆，然后部分蛤蜊浆冻干得蛤蜊肉末，剩余部分进行生物酶解，酶解后的上清液浓缩冻干得酶解冻干粉，沉淀进行美拉德反应后得得到美拉德反应粉，美拉德反应粉和酶解冻干粉混合；按照上述配方制备蛤味固体粉末，将蛤味固体粉末、蛤蜊肉末，棕榈油搅拌均匀压制即可。本发明汤块耐高温烹调，适用于各种汤类制作，本发明方法中由于采用生物酶解和美拉德结合的方法，充分提取出蛤蜊中的鲜香味物质，且富含蛋白质、氨基酸，能提升产品的风味。

公开(公告)号：CN105112344A

公开(公告)日：2015-12-02

申请号：CN201510639836.0

申请日：2015-10-08

申请人： 江南大学

发明人： 龚劲松 ,  侯璎朔 ,  罗阳 ,  翟靖鑫 ,  张楠 ,  朱佳能 ,  史劲松 ,  许正宏 ,  李恒

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12N9/48 ,  C12R1/01

摘要： 本发明公开一株角蛋白产生菌株及其培养条件和酶学性质，属于微生物技术领域。经鉴定，该菌株为副短短芽孢杆菌(Brevibacillus parabrevis)，命名为副短短芽孢杆菌R-7，现保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.10798。经初步优化，该菌株的培养基为：羊毛1%，可溶性淀粉1%，玉米粉1%，NaCl 0.15%，NH4Cl 0.05%，K2HPO4 0.03%，KH2PO4 0.04%，MgCl2·6H2O 0.01%。摇床培养条件为：初始pH值为8.0，接种量2%，培养温度40℃，转速220r/min，装液量30mL/250mL，发酵周期16h，产角蛋白酶活力达到412U/mL。该角蛋白酶最适作用温度为40℃，最适pH为7.0。该酶在制革及医药等领域具有重要应用。

公开(公告)号：CN103695341B

公开(公告)日：2015-09-23

申请号：CN201310681404.7

申请日：2013-12-16

申请人： 江南大学

发明人： 史劲松 ,  刘旭梅 ,  许正宏 ,  李恒 ,  龚劲松 ,  蒋敏

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12N9/88 ,  C12R1/01

摘要： 本发明属于生物技术领域。具体涉及从废料样品中筛选得到的一株海洋细菌Cobetia sp. WG-007及其分泌的褐藻胶裂解酶和该酶的制备方法。结合形态学及生理生化特性，该菌株属于Cobetia属,并保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.7964。该菌株分泌褐藻胶裂解酶，通过超滤浓缩、Q-Sepharose强阴离子交换层析、Phenyl Sepharose6 Fast Flow疏水层析和Superdex-G100凝胶过滤技术对其纯化，获得电泳纯度的褐藻胶裂解酶，经SDS-PAGE确定该菌株产生的褐藻胶裂解酶的分子量为35.0KDa。

公开(公告)号：CN104473123A

公开(公告)日：2015-04-01

申请号：CN201410791485.0

申请日：2014-12-19

申请人： 江南大学 ,  江苏恒顺醋业股份有限公司

发明人： 许正宏 ,  史劲松 ,  龚劲松 ,  许泓瑜 ,  陆震鸣 ,  窦文芳 ,  余永建 ,  朱胜虎 ,  王婷婷

IPC分类号： A23L1/231 ,  A23L1/228 ,  A23L1/40

摘要： 本发明公开了一种蛤味调味汤块及其制备方法，调味品包括主调味料和棕榈油，主调味料包括：蛤味固体粉末70-90%，余量为蛤蜊肉末；棕榈油的添加量为15-30g/100g蛤味固体粉末。制备时，先制备蛤蜊浆，然后部分蛤蜊浆冻干得蛤蜊肉末，剩余部分进行生物酶解，酶解后的上清液浓缩冻干得酶解冻干粉，沉淀进行美拉德反应后得得到美拉德反应粉，美拉德反应粉和酶解冻干粉混合；按照上述配方制备蛤味固体粉末，将蛤味固体粉末、蛤蜊肉末，棕榈油搅拌均匀压制即可。本发明汤块耐高温烹调，适用于各种汤类制作，本发明方法中由于采用生物酶解和美拉德结合的方法，充分提取出蛤蜊中的鲜香味物质，且富含蛋白质、氨基酸，能提升产品的风味。

公开(公告)号：CN104130998A

公开(公告)日：2014-11-05

申请号：CN201410244226.6

申请日：2014-06-05

申请人： 江南大学 ,  江西省德兴市百勤异Vc钠有限公司

发明人： 龚劲松 ,  熊雷 ,  许正宏 ,  李恒 ,  史劲松 ,  孙文敬 ,  周强

IPC分类号： C12N9/88 ,  C12N15/60 ,  C12N15/70

CPC分类号： C12N9/78 ,  C12Y305/05001

摘要： 本发明提供了一种高酶活腈水解酶突变株及其制备方法，属于基因工程领域。本发明以恶臭假单胞菌（PseudomonasputidaCGMCC3830）腈水解酶作为模板，再用分子生物学手段对恶臭假单胞菌腈水解酶序列进行饱和定点突变，获得两株酶活提高的阳性转化子Asn40Gly和Phe50Trp，在此基础上进行组合突变，获得组合突变和株Asn40Gly-Phe50Trp。在改造条件下，发现酶活均有所提高，并且热稳定性也有所改善。利用此策略可以大大提高腈水解酶的转化能力，使其应用于医药中间体、食品添加剂以及环境治理方面具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN102337233B

公开(公告)日：2014-05-21

申请号：CN201110116234.9

申请日：2011-05-06

申请人： 江南大学 ,  江西省德兴市百勤异VC钠有限公司

发明人： 许正宏 ,  史劲松 ,  朱小燕 ,  龚劲松 ,  陆震鸣 ,  孙文敬 ,  周强

IPC分类号： C12N1/20 ,  C12P17/12 ,  C12R1/40

摘要： 公开了一株新菌株恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonasputida)及应用该菌株催化生产烟酸、异烟酸的方法。本发明以3-氰基吡啶、4-氰基吡啶为原料，以发酵培养获得的具有高腈水解酶活性的恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonasputida)为催化剂进行水解反应，得到产物烟酸、异烟酸。采用流加的方式加入底物于反应器中,反应6-10h，可得到147g/L-221g/L的烟酸或异烟酸。恶臭假单胞菌CGMCC3830(Pseudomonasputida)具有生长周期短、生命力强、转化效率高、转化周期短等特点，能大大降低了烟酸、异烟酸的生产成本；本工艺具有反应条件温和、能耗低、产率高、环境友好等特点。