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公开(公告)号：CN112094843B
公开(公告)日：2022-01-11
申请号：CN202010978371.2
申请日：2020-09-17
Applicant: 江南大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N1/21 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种氧化葡萄糖酸杆菌中基因抑制的方法，属于基因工程和生物工程技术领域。本发明将相应靶基因crRNA在氧化葡萄糖酸杆菌中进行表达。通过验证对质粒上mCherry荧光表达的抑制作用，表明重组氧化葡萄糖酸杆菌有基因抑制的作用，并且通过对氧化葡萄糖酸杆菌基因组中的其他基因进行抑制，也达到了类似的抑制效果，进一步证明了此系统对基因组上基因的抑制功能。为在氧化葡萄糖酸杆菌中抑制目的基因提供了一种新方法，能够快速、有效抑制目的基因的表达，提高了对氧化葡萄糖酸杆菌的基因编辑效率。
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公开(公告)号：CN110982770B
公开(公告)日：2021-10-22
申请号：CN201911354531.X
申请日：2019-12-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种动态调控脂肪酸代谢途径强化柚皮素合成的方法动态调控策略调节脂肪酸代谢途径积累丙二酰‑CoA，并进一步强化柚皮素合成的方法，属于代谢工程技术领域。本发明以柚皮素响应蛋白FdeR为基础，利用基因过表达技术和反义RNA抑制技术等调控手段，结合组成型表达柚皮素合成途径，从而建立了一种可感应胞内柚皮素含量的动态循环放大系统，强化柚皮素合成，使柚皮素产量提升到原来的3.2倍，达95.1mg/L。本发明实现了细胞生长和产物合成之间的平衡，所述方法为其他高附加值化合物生产菌株的代谢工程改造提供方法借鉴。
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公开(公告)号：CN110438018B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201910773371.6
申请日：2019-08-21
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/15 , C12N15/90 , C12N15/113 , C12N15/80 , C12R1/685
Abstract: 本发明公开了一种快速构建曲霉重组菌株的方法，属于基因工程技术领域。本发明通过CRISPR‑Cas9对黑曲霉albA基因和黑曲霉kusA基因同时剪切，通过孢子表型快速筛选出黑曲霉kusA突变菌株，与同源重组方法突变kusA基因相比，显著提高同源重组菌株纯合子概率，白色突变体kusA破坏概率达50％，纯化子概率达100％。
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公开(公告)号：CN113150120A
公开(公告)日：2021-07-23
申请号：CN202110558529.5
申请日：2021-05-21
Applicant: 江南大学 , 江苏东汇生物科技有限公司
Abstract: 本发明公开了发酵液中猪肌红蛋白的分离纯化方法，属于生物技术领域。本发明通过在发酵液中创造性地分步添加不同浓度的硫酸铵，对表达猪肌红蛋白的重组毕赤酵母的发酵液进行浓缩，并对其进一步超滤浓缩，并对浓缩液进行纯化得到的肌红蛋白纯度达88.04％，纯化率可达66.05％，实现了从发酵液中纯化猪肌红蛋白，解决了之前猪肌红蛋白发酵液难以纯化的问题，并实现了猪肌红蛋白发酵液的高效纯化。本发明的分离纯化方法特异性高，操作条件温和，步骤简洁，纯化效果好，回收率高，成本低，速度快，益于扩大生产。
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公开(公告)号：CN113136349A
公开(公告)日：2021-07-20
申请号：CN202110607028.1
申请日：2021-05-28
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达不同来源肌红蛋白/血红蛋白毕赤酵母重组菌株的构建，属于基因工程技术领域。本发明首先实现了不同动植物来源的肌红蛋白/血红蛋白在毕赤酵母中的高效分泌表达，构建得到表达猪肌红蛋白、牛肌红蛋白、三叶草血红蛋白、大豆血红蛋白以及猪血红蛋白β单亚基的重组菌，在摇瓶条件下产量分别达到42.0mg/L、20.0mg/L、5.0mg/L、100.0mg/L与1.0mg/L；并进一步优化猪肌红蛋白在毕赤酵母中的分泌表达体系，最终构建得到的重组菌株X33‑△ku70‑△yps1‑1‑MB菌株48h摇瓶发酵产量达到69.0mg/L，较对照提高了59.4％。本发明有利于不同来源肌红蛋白/血红蛋白在人造肉等在食品加工领域的应用及进一步发展。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112852857A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110165340.X
申请日：2021-02-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种氧化葡萄糖酸杆菌中多基因敲除的方法，属于基因工程和生物工程技术领域。本发明构建了基于sacB的氧化葡萄糖酸杆菌的基因编辑工具，将多种抗性的敲除质粒转化至同一氧化葡萄糖酸杆菌中，可实现多基因的敲除，并能够促进用以提高其性能的代谢工程修饰。将本发明的基因编辑工具应用于氧化葡萄糖酸杆菌山梨糖还原酶、酮还原酶和磷酸葡萄糖酸脱水酶的敲除验证，表明该方法有多基因敲除的作用，对于合成生物学的发展具有潜在的价值和意义。
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公开(公告)号：CN112795582A
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN202110086174.4
申请日：2021-01-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种适合在微生物中高效合成NAD衍生物的酶基因，属于基因工程及生物工程技术领域。本发明通过在大肠杆菌中表达如SEQ ID NO.1～7任一所示的烟酰胺磷酸核糖基转移酶基因VpNadV，并敲除pncC基因、ushA基因、nadR基因和purR基因，提高了大肠杆菌细胞中的NAD衍生物的积累量，并通过优化发酵条件，使NAD衍生物的积累量得到进一步提高，使5L发酵体系下可获得1g/L以上的NAD衍生物，在食品、药品、化妆品、饲料、纺织品领域具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN112680434A
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN202110132935.5
申请日：2021-02-01
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高蛋白质谷氨酰胺酶分泌表达的方法，属于基因工程技术领域。在本发明中通过改造信号肽，实现了蛋白质谷氨酰胺酶在枯草芽孢杆菌中高效的胞外表达，解决了蛋白质谷氨酰胺酶胞外分泌不足的问题。本发明通过改造信号肽，使蛋白质谷氨酰胺酶的分泌酶活由0.44U/mL提高到3.2U/mL，酶活提高7.27倍，应用本发明中的信号肽明显提高了蛋白质谷氨酰胺酶的胞外分泌，降低了工业上生产蛋白质谷氨酰胺酶的成本，同时也为枯草芽孢杆菌外源分泌蛋白表达量的提高奠定了基础。
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公开(公告)号：CN112662649A
公开(公告)日：2021-04-16
申请号：CN202110124102.4
申请日：2021-01-29
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了小核菌胶水解酶突变体的制备及应用，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明提供了一系列小核菌胶水解酶突变体。突变体D36E、A76V、D144E、T161Y、S180D、D36E/D144E、D36E/S180D、D144E/S180D、D36E/D144E/S180D的小核菌胶水解酶活性比野生型分别提高了20.1％、14.2％、22.2％、15.6％、18.3％、51.4％、63.0％、48.6％、92.9％，对应的小核菌胶分子量比野生型分别降低了42.7％、30.7％、47.2％、32.9％、48.2％、55.2％、59.4％、57.4％、72.9％。小核菌胶的分子量的降低更有利于扩大其工业化应用范围。
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公开(公告)号：CN112501115A
公开(公告)日：2021-03-16
申请号：CN202011499864.4
申请日：2020-12-17
Applicant: 江南大学
IPC: C12N5/0775 , A23J1/02
Abstract: 本发明公开了一种兔肌肉干细胞的提取分离及纯化方法，属于生物技术领域。本发明的分离纯化方法包括取得无菌的肌肉组织，高效率的消化肌肉组织以得到大量的肌肉单核细胞以及通过percoll梯度纯化获得高纯度的兔肌肉干细胞。应用本发明的纯化方法，可以稳定的获得纯度超过90％(以CD56染色为阳性计)的兔肌肉干细胞。应用本发明的方法，为兔的肌肉干细胞的培养提供了有效的分离提取方法。
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