公开(公告)号：CN101979576A

公开(公告)日：2011-02-23

申请号：CN201010503402.5

申请日：2010-10-12

申请人： 江南大学 ,  中国人民解放军第四军医大学

发明人： 金坚 ,  于军 ,  李鹏 ,  房聪 ,  陈蕴 ,  朱瑞宇 ,  雷楗勇 ,  姜曰水 ,  朱妙章 ,  陈健康

IPC分类号： C12N15/16 ,  C12N15/70 ,  C07K14/575

摘要： 本发明公开了一种血管钠肽(VNP)的制备方法，为克服传统VNP化学合成法价格昂贵，生物活性低等缺陷，本发明在制备VNP过程中，用PCR技术扩增目的基因，以pGEX-4T-1为载体质粒酶切后定向插入VNP目的基因后形成重组质粒，以大肠杆菌BL21(DE3)作为表达菌株，以GST亲和柱分离目的蛋白，这种方法既能获得较高表达量的蛋白，又能通过亲和性得到较纯的蛋白。运用本发明技术获得的VNP比起化学合成法具有更好的生物学活性，且成本较化学合成法要低，为VNP进一步通过生物法生产奠定了基础。

公开(公告)号：CN114099706B

公开(公告)日：2024-10-01

申请号：CN202111442947.4

申请日：2021-11-30

申请人： 江南大学

发明人： 杨兆琪 ,  龚森怡 ,  尚孟迪 ,  金坚

IPC分类号： A61K47/69 ,  A61K41/00 ,  A61K31/704 ,  A61K47/54 ,  A61P35/00

摘要： 本发明涉及医药技术领域，尤其是涉及一种MOF药物载体及其制备方法及含有该MOF药物载体的载药体系。本发明以硝酸锌与2,2'‑二硫二吡啶为主要原料合成得到新型还原响应型金属有机框架，具有合适的粒径大小(小于200nm)，较大的比表面积，可以作为药物载体，负载阿霉素与反义核酸并包裹透明质酸。在细胞毒性试验中，与单独的Dox对MCF‑7/ADM细胞的IC50相比，Dox装载在纳米体系后(Dox/Antisense/HA@MOF)对MCF‑7/ADM细胞的IC50大大减少，证明了此纳米系统具有抗耐药的效果，减少了化疗药物的剂量；通过测定细胞内谷胱甘肽含量变化、相关蛋白的表达情况以及对活性氧产生能力进行测定，确定了新型纳米体系的抗耐药效果。

公开(公告)号：CN112553274B

公开(公告)日：2023-06-13

申请号：CN202011401295.5

申请日：2020-12-02

申请人： 江南大学

发明人： 杨兆琪 ,  龚森怡 ,  尚孟迪 ,  金坚

IPC分类号： C12P19/34

摘要： 本发明公开了大豆提取物Bowman‑Birk inhibitor切割DNA的方法，属于医药技术领域。本发明提供了大豆Bowman‑Birk胰蛋白酶抑制剂BBI‑A的一种新应用，将BBI‑A应用于DNA的切割中，通过条件的优化，使得切割效率可达100％，可有效切割DNA。为制备DNA结构探针、并且为潜在制备抗肿瘤药物提供了新的可能。

公开(公告)号：CN113969284B

公开(公告)日：2022-07-12

申请号：CN202111395511.4

申请日：2021-11-23

申请人： 江南大学

发明人： 陈蕴 ,  金坚 ,  瞿丽丽 ,  丁学峰 ,  李华钟 ,  蔡燕飞 ,  朱景宇 ,  杨兆琪 ,  鲁晨 ,  戴云峰

IPC分类号： C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85

摘要： 本发明公开了一种CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用，本发明获得的稳定表达位点位于CHO细胞基因NW_003614889.1的第103431碱基处上下游100bp范围内碱基，即第103331‑103531碱基处，可整合外源蛋白质基因并进行稳定表达。本发明通过定点整合的方式将目的基因定点整合到上述稳定表达区域，解决了随机整合所带来的整合位点不明确的问题；本发明通过CHO基因组内稳定表达位点NW_003614889.1的第103431碱基处上下游103331‑103531碱基范围内定点整合外源基因克服了位置效应所带来的表达不稳定性以及反复繁琐的细胞株筛选过程。

公开(公告)号：CN113969283B

公开(公告)日：2022-07-12

申请号：CN202111395490.6

申请日：2021-11-23

申请人： 江南大学

发明人： 陈蕴 ,  金坚 ,  丁学峰 ,  瞿丽丽 ,  李华钟 ,  蔡燕飞 ,  朱景宇 ,  杨兆琪 ,  鲁晨 ,  王恩铭

IPC分类号： C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85

摘要： 本发明公开了一种CHO细胞基因NW_003613756.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用，本发明获得的稳定表达位点位于CHO细胞基因NW_003613756.1的第101424碱基处上下游150bp范围内碱基，即第101274‑101574碱基处，可整合外源蛋白质基因并进行稳定表达。本发明通过定点整合的方式将目的基因定点整合到上述稳定表达区域，解决了随机整合所带来的整合位点不明确的问题；本发明通过CHO基因组内稳定表达位点NW_003613756.1的第101424碱基处上下游101274‑101574碱基范围内定点整合外源基因克服了位置效应所带来的表达不稳定性以及反复繁琐的细胞株筛选过程。

公开(公告)号：CN114085841A

公开(公告)日：2022-02-25

申请号：CN202111395539.8

申请日：2021-11-23

申请人： 江南大学

发明人： 陈蕴 ,  金坚 ,  丁学峰 ,  瞿丽丽 ,  李华钟 ,  蔡燕飞 ,  杨兆琪 ,  朱景宇 ,  鲁晨 ,  俞琪

IPC分类号： C12N15/12 ,  C12N15/90 ,  C12N15/85 ,  C12N15/55 ,  C12N5/10

摘要： 本发明公开了一种CHO细胞基因NW_003614092.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用，本发明获得的稳定表达位点位于CHO细胞基因NW_003614092.1的第1159467碱基处上下游100bp范围内碱基，即第1159367‑1159567碱基处，可整合外源蛋白质基因并进行稳定表达。本发明通过定点整合的方式将目的基因定点整合到上述稳定表达区域，解决了随机整合所带来的整合位点不明确的问题；本发明通过CHO基因组内稳定表达位点NW_003614092.1的第1159467碱基处上下游1159367‑1159567碱基范围内定点整合外源基因克服了位置效应所带来的表达不稳定性以及反复繁琐的细胞株筛选过程。

公开(公告)号：CN113969284A

公开(公告)日：2022-01-25

申请号：CN202111395511.4

申请日：2021-11-23

申请人： 江南大学

发明人： 陈蕴 ,  金坚 ,  瞿丽丽 ,  丁学峰 ,  李华钟 ,  蔡燕飞 ,  朱景宇 ,  杨兆琪 ,  鲁晨 ,  戴云峰

IPC分类号： C12N15/12 ,  C12N5/10 ,  C12N15/85

摘要： 本发明公开了一种CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用，本发明获得的稳定表达位点位于CHO细胞基因NW_003614889.1的第103431碱基处上下游100bp范围内碱基，即第103331‑103531碱基处，可整合外源蛋白质基因并进行稳定表达。本发明通过定点整合的方式将目的基因定点整合到上述稳定表达区域，解决了随机整合所带来的整合位点不明确的问题；本发明通过CHO基因组内稳定表达位点NW_003614889.1的第103431碱基处上下游103331‑103531碱基范围内定点整合外源基因克服了位置效应所带来的表达不稳定性以及反复繁琐的细胞株筛选过程。

公开(公告)号：CN109337927B

公开(公告)日：2021-07-06

申请号：CN201811274680.0

申请日：2018-10-30

申请人： 江南大学

发明人： 金坚 ,  李华钟 ,  周松涛 ,  陈蕴 ,  段作营 ,  龚笑海

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  C12N5/10

摘要： 本发明公开了一种CHO细胞基因组内NW_006880285‑1稳定表达蛋白质的应用,所述CHO细胞基因组内用于稳定表达蛋白质的位点位于CHO细胞基因NW_006880285.1的第1235357碱基处；所述位点附近1235284‑1235429范围内可被CRISPR/Cas9技术识别的5'NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGG3'为靶序列。本发明申请在CHO细胞基因组内的固定位置，导入不同蛋白质基因，并进行稳定表达。

公开(公告)号：CN109321604B

公开(公告)日：2021-07-06

申请号：CN201811274640.6

申请日：2018-10-30

申请人： 江南大学

发明人： 李华钟 ,  金坚 ,  周松涛 ,  陈蕴 ,  段作营 ,  龚笑海

IPC分类号： C12N15/90 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10

摘要： 本发明公开了一种CHO细胞基因组内NW_006882077‑1稳定表达蛋白质的应用，所述CHO细胞基因组内用于稳定表达蛋白质的位点位于CHO细胞基因NW_006882077.1的第691045碱基处；所述位点附近690980‑691090范围内可被CRISPR/Cas9技术识别的5'NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGG3'为靶序列。本发明申请在CHO细胞基因组内的固定位置，导入不同蛋白质基因，并进行稳定表达。

公开(公告)号：CN112335684A

公开(公告)日：2021-02-09

申请号：CN202011232685.4

申请日：2020-11-06

申请人： 江南大学

发明人： 沈志松 ,  金坚 ,  陈蕴

IPC分类号： A01N63/30 ,  A01P3/00 ,  A01G13/00 ,  A01B79/02

摘要： 本发明公开了一种微生物新农药在防治作物纹枯病中的应用，属于生物农药和重大农业生物灾害防控技术领域。本发明发现一种对病原菌立枯丝核菌和禾谷丝核菌具有致腐作用的微生物新农药，即小盾壳霉或其制剂。试验发现，小盾壳霉对由立枯丝核菌和禾谷丝核菌引起的作物纹枯病具有防治功效。采用小盾壳霉或其制剂防治作物纹枯病，除了微生物农药特有的无毒、无残留、对环境友好和病原菌不会产生抗药性等特点外，还具有药效好(最高防效100％)、性能稳定(持效期长达240天)、使用方法简单(一季只要施药一次)和费用低(与化学农药相当)等特点，有望成为世界上第一个能与井冈霉素和三唑类等化学杀菌剂媲美的防治作物纹枯病的微生物农药。