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公开(公告)号：CN101979576A
公开(公告)日：2011-02-23
申请号：CN201010503402.5
申请日：2010-10-12
申请人： 江南大学 , 中国人民解放军第四军医大学
IPC分类号： C12N15/16 , C12N15/70 , C07K14/575
摘要： 本发明公开了一种血管钠肽(VNP)的制备方法，为克服传统VNP化学合成法价格昂贵，生物活性低等缺陷，本发明在制备VNP过程中，用PCR技术扩增目的基因，以pGEX-4T-1为载体质粒酶切后定向插入VNP目的基因后形成重组质粒，以大肠杆菌BL21(DE3)作为表达菌株，以GST亲和柱分离目的蛋白，这种方法既能获得较高表达量的蛋白，又能通过亲和性得到较纯的蛋白。运用本发明技术获得的VNP比起化学合成法具有更好的生物学活性，且成本较化学合成法要低，为VNP进一步通过生物法生产奠定了基础。
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公开(公告)号：CN113969284B
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202111395511.4
申请日：2021-11-23
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用，本发明获得的稳定表达位点位于CHO细胞基因NW_003614889.1的第103431碱基处上下游100bp范围内碱基，即第103331‑103531碱基处，可整合外源蛋白质基因并进行稳定表达。本发明通过定点整合的方式将目的基因定点整合到上述稳定表达区域，解决了随机整合所带来的整合位点不明确的问题；本发明通过CHO基因组内稳定表达位点NW_003614889.1的第103431碱基处上下游103331‑103531碱基范围内定点整合外源基因克服了位置效应所带来的表达不稳定性以及反复繁琐的细胞株筛选过程。
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公开(公告)号：CN113969283B
公开(公告)日：2022-07-12
申请号：CN202111395490.6
申请日：2021-11-23
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种CHO细胞基因NW_003613756.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用，本发明获得的稳定表达位点位于CHO细胞基因NW_003613756.1的第101424碱基处上下游150bp范围内碱基，即第101274‑101574碱基处，可整合外源蛋白质基因并进行稳定表达。本发明通过定点整合的方式将目的基因定点整合到上述稳定表达区域，解决了随机整合所带来的整合位点不明确的问题；本发明通过CHO基因组内稳定表达位点NW_003613756.1的第101424碱基处上下游101274‑101574碱基范围内定点整合外源基因克服了位置效应所带来的表达不稳定性以及反复繁琐的细胞株筛选过程。
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公开(公告)号：CN114085841A
公开(公告)日：2022-02-25
申请号：CN202111395539.8
申请日：2021-11-23
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种CHO细胞基因NW_003614092.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用，本发明获得的稳定表达位点位于CHO细胞基因NW_003614092.1的第1159467碱基处上下游100bp范围内碱基，即第1159367‑1159567碱基处，可整合外源蛋白质基因并进行稳定表达。本发明通过定点整合的方式将目的基因定点整合到上述稳定表达区域，解决了随机整合所带来的整合位点不明确的问题；本发明通过CHO基因组内稳定表达位点NW_003614092.1的第1159467碱基处上下游1159367‑1159567碱基范围内定点整合外源基因克服了位置效应所带来的表达不稳定性以及反复繁琐的细胞株筛选过程。
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公开(公告)号：CN113969284A
公开(公告)日：2022-01-25
申请号：CN202111395511.4
申请日：2021-11-23
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种CHO细胞基因NW_003614889.1内稳定表达蛋白质的位点及其应用，本发明获得的稳定表达位点位于CHO细胞基因NW_003614889.1的第103431碱基处上下游100bp范围内碱基，即第103331‑103531碱基处，可整合外源蛋白质基因并进行稳定表达。本发明通过定点整合的方式将目的基因定点整合到上述稳定表达区域，解决了随机整合所带来的整合位点不明确的问题；本发明通过CHO基因组内稳定表达位点NW_003614889.1的第103431碱基处上下游103331‑103531碱基范围内定点整合外源基因克服了位置效应所带来的表达不稳定性以及反复繁琐的细胞株筛选过程。
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公开(公告)号：CN109337927B
公开(公告)日：2021-07-06
申请号：CN201811274680.0
申请日：2018-10-30
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种CHO细胞基因组内NW_006880285‑1稳定表达蛋白质的应用,所述CHO细胞基因组内用于稳定表达蛋白质的位点位于CHO细胞基因NW_006880285.1的第1235357碱基处；所述位点附近1235284‑1235429范围内可被CRISPR/Cas9技术识别的5'NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGG3'为靶序列。本发明申请在CHO细胞基因组内的固定位置，导入不同蛋白质基因，并进行稳定表达。
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公开(公告)号：CN109321604B
公开(公告)日：2021-07-06
申请号：CN201811274640.6
申请日：2018-10-30
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种CHO细胞基因组内NW_006882077‑1稳定表达蛋白质的应用，所述CHO细胞基因组内用于稳定表达蛋白质的位点位于CHO细胞基因NW_006882077.1的第691045碱基处；所述位点附近690980‑691090范围内可被CRISPR/Cas9技术识别的5'NNNNNNNNNNNNNNNNNNNNNGG3'为靶序列。本发明申请在CHO细胞基因组内的固定位置，导入不同蛋白质基因，并进行稳定表达。
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公开(公告)号：CN112335684A
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN202011232685.4
申请日：2020-11-06
申请人： 江南大学
摘要： 本发明公开了一种微生物新农药在防治作物纹枯病中的应用，属于生物农药和重大农业生物灾害防控技术领域。本发明发现一种对病原菌立枯丝核菌和禾谷丝核菌具有致腐作用的微生物新农药，即小盾壳霉或其制剂。试验发现，小盾壳霉对由立枯丝核菌和禾谷丝核菌引起的作物纹枯病具有防治功效。采用小盾壳霉或其制剂防治作物纹枯病，除了微生物农药特有的无毒、无残留、对环境友好和病原菌不会产生抗药性等特点外，还具有药效好(最高防效100％)、性能稳定(持效期长达240天)、使用方法简单(一季只要施药一次)和费用低(与化学农药相当)等特点，有望成为世界上第一个能与井冈霉素和三唑类等化学杀菌剂媲美的防治作物纹枯病的微生物农药。
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公开(公告)号：CN108739805A
公开(公告)日：2018-11-06
申请号：CN201810478144.6
申请日：2018-05-18
申请人： 无锡楗农生物科技有限公司 , 江南大学
摘要： 本发明涉及一种生物农药可湿性粉剂的制备方法及其在油菜、向日葵等作物的菌核病防治中的应用，属于生物农药技术领域。本发明的生物农药可湿性粉剂以固体发酵制备的小盾壳霉孢子粉为有效成分，加入一定量的载体和助剂制备而成。该生物农药可湿性粉剂采用预埋法施入土壤，可有效防治油菜、向日葵等经济作物的菌核病。
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公开(公告)号：CN104789594A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510205988.X
申请日：2015-04-27
申请人： 江南大学
IPC分类号： C12N15/85 , C12N5/10 , C07K19/00 , A61K38/20 , A61K47/48 , A61P35/00 , A61P1/16 , A61P11/00 , A61P37/04
摘要： 一种稳定高效表达人血清白蛋白和白介素Ⅱ融合蛋白的CHO细胞株的构建方法，通过将带有人血清白蛋白和人白介素Ⅱ融合基因的质粒电转至CHO细胞中，获得稳定、高效表达人源重组蛋白的CHO单克隆细胞株。本发明获得的单克隆细胞株可以分泌表达人血清白蛋白和人白介素Ⅱ融合蛋白，蛋白表达量较高，经分离纯化所获得融合蛋白，两种融合蛋白体外生物活性均比等摩尔单体IL-2活性要高，将成为广泛应用于肿瘤、肝炎、肺炎和免疫缺陷性疾病等多种疾病治疗的药物。
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