一种转基因黑点青鳉的制备方法

    公开(公告)号:CN106995823A

    公开(公告)日:2017-08-01

    申请号:CN201710239770.5

    申请日:2017-04-13

    申请人: 厦门大学

    IPC分类号: C12N15/85 A01K67/027

    摘要: 一种转基因黑点青鳉的制备方法,涉及基因工程。CYP1A启动子序列的改造;Tol2转座子系统敲入质粒的构建和显微注射样品的制备;黑点青鳉胚胎的显微注射技术和继代培养。用TCDD作为标准物质,探究转基因黑点青鳉在TCDD刺激下绿色荧光蛋白的表达情况。提供一种含有12个DRE的CYP1A启动子的构建方法,以及含有该启动子连接绿色荧光蛋白基因的重组Tol2转座子敲入质粒,质粒线性化纯化的方法和显微注射样品的配方。通过显微注射技术制备得到的Tg(pCYP1A‑6×DRE‑EGFP)和Tg(pCYP1A‑12×DRE‑EGFP)转基因黑点青鳉,对比了含有6个DRE与12个DRE启动子的活性。

    一种果蝇转基因表达水平的调控方法

    公开(公告)号:CN107201379A

    公开(公告)日:2017-09-26

    申请号:CN201710366405.0

    申请日:2017-05-23

    申请人: 山西大学

    IPC分类号: C12N15/85 A01K67/033

    摘要: 本发明涉及一种果蝇转基因表达水平的调控方法,属于生物技术领域。本发明主要解决现有Gal4/UAS对靶基因表达水平操控不够灵活的问题。技术方案是:一种果蝇转基因表达水平的调控方法,包括以下步骤:1)首先将靶基因的过表达转基因序列和RNAi转基因序列进行重组;2)用同一Gal4驱动该品系;3)将子代在16‑18℃低温下培养,控制靶基因温和地过表达;4)在29‑30℃高温下进行培养,抑制靶基因表达;5)低温(16‑18℃)培养后转入高温(29‑30℃)培养,使靶基因的过表达,再抑制表达;6)高温(29‑30℃)培养后转入低温(16‑18℃),控制靶基因先抑制表达,再转为过表达。