公开(公告)号：CN106957858A

公开(公告)日：2017-07-18

申请号：CN201610854587.1

申请日：2016-09-23

申请人： 西北农林科技大学

发明人： 陈玉林 ,  王小龙 ,  蔡蓓 ,  牛怡源 ,  马宝华

IPC分类号： C12N15/85 ,  A01K67/027

CPC分类号： C12N15/85 ,  A01K67/0276 ,  A01K2217/075 ,  A01K2227/103 ,  C12N2800/106 ,  C12N2800/80

摘要： 本发明提供了一种利用CRISPR/Cas9系统共同敲除绵羊MSTN、ASIP、BCO2基因的方法。本发明首先获得针对绵羊MSTN第二外显子和第三外显子的sgRNA识别区的两段DNA序列、针对绵羊ASIP第五外显子的sgRNA识别区的两段DNA序列、针对绵羊BCO2第二外显子的sgRNA识别区的两段DNA序列，分别设计并和成相应的sgRNA寡核苷酸序列；接着分别构建针对绵羊MSTN第二外显子和第三外显子、针对绵羊ASIP第五外显子、针对绵羊BCO2第二外显子，且含T7启动子的saRNA体外转录载体；利用Cas9和sgRNA的体外转录载体通过体外转录获得Cas9 mRNA和sgRNA，通过受精卵注射可用于生产MSTN、ASIP、BCO2共同敲除的转基因绵羊。

公开(公告)号：CN106191112A

公开(公告)日：2016-12-07

申请号：CN201610599740.0

申请日：2016-07-27

申请人： 湖南师范大学

发明人： 陈湘定 ,  刘薇薇 ,  苏幸 ,  邵梦思 ,  邓云 ,  谭丽君 ,  邓红文

IPC分类号： C12N15/85 ,  A01K67/027

CPC分类号： C12N15/8509 ,  A01K67/0276 ,  A01K2217/075 ,  A01K2227/40 ,  A01K2267/02 ,  A01K2267/03 ,  C07K14/461 ,  C12N2800/106 ,  C12N2800/80 ,  C12N2810/10

摘要： 本发明公开了一种基因敲除选育wnt16基因缺失型斑马鱼的方法，与现有技术相比，本发明能更高效且更精确地在生物体基因组中沉默特定基因，且制作简单、成本低，且可同时对靶基因上多个位点进行剪切，沉默任意数目的单个基因。用于进行基因与骨骼发育的相关研究，也可进项其他方面探索研究，检测wnt16基因的缺失与其他器官的发育是否具有相关性，例如心脏具有很好的医学研究价值，同时敲除wnt16基因的斑马鱼其成长周期明显缩短，也具有很好的商业价值。

公开(公告)号：CN105918255A

公开(公告)日：2016-09-07

申请号：CN201610385062.8

申请日：2016-06-02

申请人： 贵州医科大学

发明人： 舒莉萍 ,  何志旭 ,  周艳华 ,  庹媛媛 ,  尚鲁俊 ,  吴西军 ,  崔冬冰

IPC分类号： A01K67/027 ,  A01K67/02 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65

CPC分类号： A01K67/0275 ,  A01K67/02 ,  A01K2217/05 ,  A01K2227/40 ,  A01K2267/0306 ,  C12N15/65 ,  C12N15/8509 ,  C12N2800/106

摘要： 本发明公开了一种G6PD118‑144位点缺陷的转基因斑马鱼模型，该模型是由红系细胞特异性启动子gata1驱动118‑144位点缺失的突变g6pd基因，同时也是表达EGFP的可示踪的转基因斑马鱼模型。其优点在于：gata‑1是原始红系发育中的特异性的转录因子，标记早期红系细胞。在24hpf，斑马鱼的血液循环开始建立，利用gata‑1 作为驱动突变的g6pd 基因的启动子可以使突变型g6pd 基因在红细胞中特异性表达。gata1同时驱动g6pd与egfp基因，可实现突变型g6pd基因在红细胞中表达的“可示踪”观察。斑马鱼胚胎与成鱼通体透明，构建的该动物模型可以在显微镜下示踪胚胎和鱼体内荧光标记红细胞在药物诱导下的变化规律，为筛选治疗G6PD缺乏症的药物提供可视的动物模型。

公开(公告)号：CN102199595A

公开(公告)日：2011-09-28

申请号：CN201010246876.6

申请日：2010-08-04

申请人： 香港城市大学

发明人： 郑淑娴 ,  陈雪平

IPC分类号： C12N15/11 ,  C12N15/63 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  A01K67/027 ,  G01N21/64

CPC分类号： A01K67/0275 ,  A01K2217/05 ,  A01K2217/052 ,  A01K2217/203 ,  A01K2217/206 ,  A01K2227/40 ,  A01K2267/0393 ,  C12N15/63 ,  C12N15/8509 ,  C12N2800/106 ,  C12N2830/002 ,  C12N2830/008

摘要： 本发明涉及一种表达盒，其包含编码报告蛋白的报告核苷酸序列、从青鳉鱼分离的雌激素反应5′-调控核苷酸序列和可操作地连接到所述报告核苷酸序列3′端的3′-调控区，其中所述调控核苷酸序列可操作地连接到所述报告核苷酸序列的5′端，以在雌激素或雌激素样化合物存在下诱导报告蛋白表达。本发明还涉及具有上述表达盒的转基因鱼。本发明还涉及出于各种目的使用所述转基因鱼的方法，所述目的包括例如：(1)鉴定雌激素内分泌干扰物；(2)监测测试样品的雌激素样活性；(3)鉴定抗雌激素内分泌干扰物；和(4)研究内分泌干扰物对肝脏再生的影响。本发明还公开了宿主细胞和水生动物的转基因细胞等。

公开(公告)号：CN101437547A

公开(公告)日：2009-05-20

申请号：CN200680008503.7

申请日：2006-01-20

申请人： 自然科技公司

发明人： 詹姆士·A·威廉姆斯

IPC分类号： A61K49/00 ,  A61K9/66

CPC分类号： A61K39/00 ,  A61K2039/53 ,  C12N15/85 ,  C12N2800/106 ,  C12N2800/107 ,  C12N2830/15

摘要： 公开了改良的DNA疫苗质粒。所述改良的质粒清除了所有的外源序列，并具有优良的真核表达、细菌生产过程中提高的产率和稳定性，促进抗原灵活靶向各个细胞内目的地，和新的基于RNA的功能性。这些载体被用于新的免疫方法，其中使抗原靶向各个细胞内目的地的免疫刺激DNA疫苗质粒的组合用以引发提高的免疫反应。

公开(公告)号：CN109679996A

公开(公告)日：2019-04-26

申请号：CN201811560859.2

申请日：2018-03-07

申请人： 江苏润洁生物科技有限公司

发明人： 庞以芹 ,  谢亦武 ,  吴必杰 ,  魏勇

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/62 ,  C07K16/02 ,  C07K16/08 ,  A61K39/42 ,  A61K9/127 ,  A61K31/785 ,  A61P31/20 ,  A61P31/02 ,  A61P35/00

CPC分类号： C12N15/85 ,  A61K9/0034 ,  A61K9/127 ,  A61K31/785 ,  A61K39/42 ,  A61K2039/505 ,  A61P31/02 ,  A61P31/20 ,  A61P35/00 ,  C07K14/005 ,  C07K16/02 ,  C07K16/084 ,  C07K2319/02 ,  C07K2319/21 ,  C12N2710/20022 ,  C12N2800/106 ,  A61K2300/00

摘要： 本发明属于生物医学领域，具体涉及一种HPV L1重组微环DNA的卵黄抗体及其在制备预防/治疗HPV感染的药物中的应用。其中HPV L1重组微环DNA包含HPV16的L1基因片段以及信号肽序列，将其作为核酸抗原直接免疫产蛋鸡获得本发明的卵黄抗体。DNA核酸抗原肌肉注射免疫产蛋鸡所获得的卵黄抗体(IgY)的生物活性远超一般技术(皮下注射蛋白抗原)制备的卵黄抗体，抗体效价更高，特异性更强。本发明的卵黄抗体可用于制备预防/治疗HPV感染的药物，阴道用药对HPV阳性患者输入高活性抗HPV抗体，结合纳米脂质体的方法，抗体跨膜进入细胞，直接中和细胞内的HPV病毒。本发明的卵黄抗体对于预防宫颈癌有重要意义。

公开(公告)号：CN107858323A

公开(公告)日：2018-03-30

申请号：CN201711092592.4

申请日：2017-11-08

申请人： 广东省生物资源应用研究所

发明人： 曹代男 ,  段好冉 ,  魏玉峰 ,  杨江波 ,  万小娟 ,  葛研 ,  龚世平

IPC分类号： C12N5/073 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65

CPC分类号： C12N5/0603 ,  C12N5/0656 ,  C12N15/65 ,  C12N15/85 ,  C12N2800/106

摘要： 本发明公开了一种红耳龟胚胎成纤维细胞系及其构建方法。它是取孵化至第12～18d的红耳龟卵，挑选活胚后对红耳龟卵进行消毒，去壳取红耳龟胚，弃头、四肢及内脏，余下的胚胎组织用含双抗的PBS冲洗至无明显血迹；将冲洗至无明显血迹的胚胎组织用胰蛋白酶消化，收集消化下来的单细胞，将单细胞接种于完全培养基中静置培养，当细胞部分贴壁且稍加振荡也不浮起时，吸去完全培养基和尚未贴壁的细胞，剩下的贴壁细胞加入新的完全培养基后继续培养；当原代培养的细胞汇合度达到90％以上时，用胰蛋白酶消化，收集单细胞，再接种于完全培养基中进行传代培养。本发明为进一步利用RSTEFs进行基础理论和实验研究奠定了材料和技术基础。

公开(公告)号：CN107502622A

公开(公告)日：2017-12-22

申请号：CN201610415590.3

申请日：2016-06-14

申请人： 广东省农业科学院动物卫生研究所

发明人： 马艳平 ,  梁志凌 ,  柯浩 ,  刘振兴 ,  郝乐 ,  马江耀

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/66 ,  A61K48/00 ,  A61K39/09 ,  A61P31/04

CPC分类号： C12N15/85 ,  A61K39/09 ,  A61K2039/53 ,  C07K14/315 ,  C12N15/66 ,  C12N2800/106

摘要： 本发明公开了一种Sip基因重组载体、壳聚糖-PLGA包裹Sip基因DNA疫苗及其制备方法和应用；采用限制性核酸内切酶HindⅢ和BamHⅠ酶切罗非鱼无乳链球菌Sip基因和pcDNA3.1(+)质粒，然后构建罗非鱼无乳链球菌Sip真核表达重组质粒；以PLGA、PVA、壳聚糖为原料，采用乳化扩散法包裹重组质粒，即得壳聚糖-PLGA包裹Sip基因DNA疫苗。本发明方法制备的疫苗免疫罗非鱼，其有效免疫保护率在50％-100％之间，最高血清效价达1:256。而且该疫苗的本质是含重组质粒的纳米颗粒，因此易于保存和运输。

公开(公告)号：CN107058320A

公开(公告)日：2017-08-18

申请号：CN201710235846.7

申请日：2017-04-12

申请人： 南开大学

发明人： 李玉皓 ,  蔡世娇 ,  陈阳

IPC分类号： C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  C12N15/85 ,  A01K67/027 ,  C12Q1/68

CPC分类号： C12N15/1138 ,  A01K67/0276 ,  A01K2217/075 ,  A01K2227/40 ,  C07K14/461 ,  C12N15/8509 ,  C12N2310/10 ,  C12N2800/106 ,  C12N2800/80

摘要： 本发明公开了一种IL7R基因缺失斑马鱼突变体及其制备方法，IL7R基因缺失斑马鱼突变体的构建是通过CRISPR/Cas9技术实现的。另外，本发明还公开了IL7R基因缺失斑马鱼突变体的应用，本发明的突变体模型可用于研究IL7R在神经系统发育及髓鞘形成中的作用。

公开(公告)号：CN106957857A

公开(公告)日：2017-07-18

申请号：CN201610854586.7

申请日：2016-09-23

申请人： 西北农林科技大学

发明人： 王小龙 ,  陈玉林 ,  蔡蓓 ,  牛怡源 ,  马宝华

IPC分类号： C12N15/85 ,  A01K67/027

CPC分类号： C12N15/85 ,  A01K67/0276 ,  A01K2217/075 ,  A01K2227/102 ,  C07K14/495 ,  C07K14/50 ,  C12N2800/106 ,  C12N2800/80 ,  C12N2810/10

摘要： 本发明提供了一种利用CRISPR/Cas9系统共同敲除山羊MSTN和FGF5基因的方法。本发明首先获得针对山羊MSTN第二外显子和第三外显子的sgRNA识别区的两段DNA序列，及针对山羊FGF5第一外显子的sgRNA识别区的两段DNA序列，分别设计并合成相应的sgRNA寡核苷酸序列；接着分别构建针对MSTN第二外显子和第三外显子、FGF5第一外显子且含T7启动子的体外转录载体；利用Cas9和sgRNA的体外转录载体获得Cas9 mRNA和sgRNA，可用于生产MSTN和FGF5共同敲除的转基因山羊。