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公开(公告)号：CN116098893B
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202310056966.6
申请日：2023-01-17
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: A61K31/365 , A61P31/14
Abstract: 本申请属于动物疫病防控技术领域，具体涉及一种化合物Thapsigargin在制备预防或治疗猪流行性腹泻药物中的应用。本发明意外发现化合物Thapsigargin能够抑制PEDV增殖，对PEDV具有一定的抑制作用，可抑制PEDV在细胞内的感染扩增，可用于制备预防或治疗猪流行性腹泻药物，为PED的防控奠定一定的技术基础，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN117683738A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202410093132.7
申请日：2024-01-23
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心兰州分中心)
Abstract: 本发明提供了一种交叉反应性提高、抗原谱拓展的重组O型口蹄疫疫苗毒株及其构建方法和应用，属于生物制品技术领域。一种O型口蹄疫疫苗毒株，在O型口蹄疫病毒rHN/TURVP1的基础上对VP1结构蛋白进行以下改造：重组表达插入有Cathay拓扑型流行毒株VP1的G‑H环基因的口蹄疫病毒O/TUR/5/2009株VP1结构蛋白。利用反向遗传学手段在口蹄疫病毒VP1基因中插入Cathay拓扑型流行毒株G‑H环基因，成功构建了含双G‑H环的重组病毒，该病毒遗传稳定，制备的疫苗免疫猪显著提高对Cathay型流行病毒的交叉反应性，拓展重组口蹄疫病毒的抗原谱，有潜力作为疫苗候选株用于我国当前流行O型口蹄疫的有效防控。
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公开(公告)号：CN117683120A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311505054.9
申请日：2023-11-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明涉及生物医学技术领域，具体为一株LSDV ORF123单克隆抗体的重链和轻链可变区基因序列、表达免疫球蛋白全基因序列及其应用，本发明利用杂交瘤测序，提取杂交瘤细胞(1G1‑1G12)总RNA，后以总RNA中mRNA为模板，进行反转录得到对应抗体基因的cDNA，再用特异性PCR获得对应抗体的重链可变区(Variable region ofheavy chain,VH)和轻链可变区(Variable region oflight chain,VL)，并进行克隆和测序分析。最终，获得靶向LSDV ORF123蛋白一株单克隆抗体(1G1‑1G12)重链和轻链可变区基因核苷酸序列，实现本发明。对上述一株单克隆抗体的重链(VH)和轻链抗体(VL)的序列分析表明：1G1‑1G12的VH和VL基因亚型，重链为IgG型，轻链为κ型。
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公开(公告)号：CN117534734A
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202311779320.7
申请日：2023-12-22
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C07K14/01 , C07K19/00 , C12N15/34 , C12N15/70 , C12N1/21 , G01N33/577 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61P31/20 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒p30蛋白优势抗原表位区及其应用。本发明以大肠杆菌表达的非洲猪瘟病毒p30蛋白为免疫原，免疫小鼠，利用传统的杂交瘤技术制备了20株针对p30蛋白的单克隆抗体；通过使用一系列重叠肽和丙氨酸突变的重组蛋白鉴定出这20株单抗识别的表位，获得了一种非洲猪瘟病毒p30蛋白抗原表位区；相较于目前已经报道的p30蛋白表位肽，本申请所述的非洲猪瘟病毒p30蛋白抗原表位区与非洲猪瘟阳性血清具有较强的反应性，为p30蛋白优势抗原表位区，为非洲猪瘟检测试剂盒、非洲猪瘟新型疫苗的研发提供物质基础和技术支撑。
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公开(公告)号：CN117467617A
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311360016.9
申请日：2023-10-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N15/87 , A61K35/22 , A61K31/7105 , A61P31/20
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种敲除vimentin基因的MA‑104细胞系MA‑104‑KO‑vimentin及其构建方法和应用。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的保藏编号为CCTCC:C2023142或CCTCC:C2023229。细胞系MA‑104‑KO‑vimentin的构建方法，包括：（1）gRNA设计。（2）将gRNA通过瞬时转染到细胞中，通过CAT Tool分析切割效率，选择切割效率最高的gRNA用于生产KO细胞系。（3）单克隆细胞培养。（4）单克隆细胞筛选。本发明利用CRISPR‑Cas9系统构建了稳敲除vimentin基因的MA‑104细胞系。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117417895A
公开(公告)日：2024-01-19
申请号：CN202311352822.1
申请日：2023-10-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: C12N5/10 , C12N15/12 , C12N7/00 , C12N15/113
Abstract: 本发明属于基因工程领域，具体涉及ATG16L1或其WD40结构域敲除细胞系作为小RNA病毒科病毒生产细胞系的应用。本发明首先发现，抑制宿主细胞中ATG16L1或其WD40结构域的表达能促进小RNA病毒科病毒的复制；其次，本发明提供了特异性靶向ATG16L1基因WD40结构域的sgRNA，所述sgRNA能够特异性靶向WD40基因，结合CRISPR‑Cas9技术，在细胞系中实现了WD40结构域的敲除，获得的单克隆细胞系能够显著促进小RNA病毒科病毒的复制，提高小RNA病毒科病毒疫苗的生产量和抗原表达量，可作为小核糖核酸病毒科病毒疫苗的生产细胞系，具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN117388491A
公开(公告)日：2024-01-12
申请号：CN202311263433.1
申请日：2023-09-27
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , C07K16/10
Abstract: 本发明属于生物技术领域，涉及兽用诊断技术领域，具体的公开了一种猪塞内卡病毒中和抗体液相阻断ELISA试剂盒，所述试剂盒含猪塞内卡病毒单域抗体以及配套的检测试剂，所述猪塞内卡病毒单域抗体还可以是单域抗体的抗原结合片段，所述单域抗体选自52组中的一组或多组，所述每组单域抗体或抗原结合片段的重链可变区包含CDR‑1、CDR‑2和CDR‑3，所述52组单域抗体或抗原结合片段的重链可变区CDR‑1(VH‑CDR‑1)的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.1～SEQ ID NO.52所示，重链可变区CDR‑2(VH‑CDR‑2)的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.53～SEQ ID NO.104所示，重链可变区CDR‑3(VH‑CDR‑3)的氨基酸序列分别为SEQ ID NO.105～SEQ ID NO.156所示。本发明的试剂盒可对血清中的SVA中和抗体水平进行快速检测，其敏感性高、特异性好、结果稳定，可更好地应用于SVA疫苗效力评价。
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公开(公告)号：CN117281894A
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202311271332.9
申请日：2023-09-28
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种非洲猪瘟病毒活载体疫苗及其制备方法和应用。所述的非洲猪瘟病毒活载体疫苗中包含表达非洲猪瘟病毒p72基因的重组水泡性口炎病毒或表达p30与p54融合基因的重组水泡性口炎病毒中的至少一种或二者的组合。本发明构建的非洲猪瘟病毒活载体疫苗不仅能在BHK‑21细胞中稳定遗传、具有与病毒载体同样的生长特异性，能在BHK‑21细胞内表达靶标蛋白。更为重要的是，免疫后特异性抗体持续升高，几乎无“免疫窗口期”关键问题，而且免疫血清能够诱导产生中和抗体，疫苗也能够诱导强烈的细胞免疫应答反应，两种疫苗免疫效果更为显著。因此，本发明构建的非洲猪瘟病毒活载体疫苗是一种非常具有应用前景的疫苗。
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公开(公告)号：CN117224669A
公开(公告)日：2023-12-15
申请号：CN202310952563.X
申请日：2023-07-31
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Inventor： 郑海学 , 马旭升 , 李茜 , 辇晓峰 , 尚小粉 , 罗志宽 , 代军飞 , 裴晶晶 , 朱紫祥 , 杨帆 , 曹伟军 , 茹毅 , 冯涛 , 张克山 , 田宏 , 唐静 , 李志煜 , 刘家楠
Abstract: 本发明属于病毒免疫学领域，具体涉及非洲猪瘟病毒MGF360‑21R基蛋白作为免疫诱导剂或者佐剂的应用，同时涉及该蛋白的功能鉴定。具体如：ASFV MGF360‑21R蛋白能够作为免疫应答诱导剂或者佐剂进行应用；ASFV MGF360‑21R可作为炎症应答的激动剂进行应用。本发明构建ASFV MGF360‑21R蛋白的重组慢病毒并感染小鼠后，发现小鼠血清和动物组织的炎性细胞因子产生且分泌上调。本发明为ASFV的防控以及MGF360‑21R蛋白可以作为佐剂激活炎症反应提供了新的支持。
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公开(公告)号：CN117210502A
公开(公告)日：2023-12-12
申请号：CN202311178981.4
申请日：2023-09-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及口蹄疫病毒VP1蛋白免疫抑制位点突变的重组口蹄疫病毒株的构建。本发明发现口蹄疫病毒VP1蛋白的第209位氨基酸是抑制NOG1蛋白表达的关键位点，将VP1蛋白的第209位氨基酸突变为A后，抑制NOG1蛋白的表达，促进IFN‑β蛋白的表达；其次，本发明将VP1蛋白的第209位氨基酸突变为A后成功拯救获得了口蹄疫病毒VP1蛋白的免疫抑制位点突变的口蹄疫重组病毒株rFMDV‑VP1Q209A，与野生型FMDV相比，rFMDV‑VP1Q209A的毒价显著降低，毒力降低，且抑制NOG1蛋白表达的同时诱导IFN‑β表达的能力显著增加，可作为重组疫苗株，具备良好的应用前景。
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