高产2,3-丁二醇的产酸克雷伯氏基因工程菌株的构建方法及其发酵方法

    公开(公告)号:CN105647953A

    公开(公告)日:2016-06-08

    申请号:CN201610157897.8

    申请日:2016-03-18

    申请人: 黑龙江大学

    摘要: 高产2,3-丁二醇的产酸克雷伯氏基因工程菌株的构建方法及其发酵方法,涉及一种高产2,3-丁二醇的基因工程菌株的构建方法及其发酵方法。本发明是为了解决目前产酸克雷伯氏菌产2,3-丁二醇产量低、转化率低、生产强度低及纯度低的问题。构建方法:一、ack基因同源左臂片段ack-L和右臂片段ack-R的构建;二、pack-L和pack-R质粒构建;三、pack-LR质粒构建;四、pT-Kanr质粒构建;五、同源重组片段ackL-Kanr-ackR的构建;六、K.oxytoca HD79-01/pKD46菌株构建;七、ackL-Kanr-ackR转化K.oxytoca HD79-01/pKD46。发酵方法:一、将产酸克雷伯氏基因工程菌株接种到种子培养基中,培养至对数生长期,得种子液;二、将种子液接种到发酵培养基中,底物葡萄糖150g/L,发酵,结束。本发明用于生产2,3-丁二醇。