公开(公告)号：US09045730B2

公开(公告)日：2015-06-02

申请号：US12454643

申请日：2009-05-19

申请人： Brock Binkowski ,  Lance P. Encell ,  Monika G. Wood ,  Keith V. Wood ,  Kris Zimmerman ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Pete Stecha

发明人： Brock Binkowski ,  Lance P. Encell ,  Monika G. Wood ,  Keith V. Wood ,  Kris Zimmerman ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Pete Stecha

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12N15/53 ,  C12Q1/66 ,  C12Q1/00 ,  G01N33/573

CPC分类号： C12Q1/66 ,  C07K2319/20 ,  C07K2319/61 ,  C12N9/0004 ,  C12N9/0069 ,  C12Q1/008 ,  C12Q1/6876 ,  C12Y113/12 ,  C12Y114/00 ,  G01N33/5735 ,  G01N33/74 ,  G01N2333/726 ,  G01N2333/90241

摘要： A modified luciferase protein which is a sensor for molecules including cAMP is provided. The modified luciferase protein includes one or more heterologous amino acid sequences, at least one of which directly or indirectly interacts with cAMP.

摘要翻译： 提供了一种修饰的荧光素酶蛋白，其是包括cAMP的分子的传感器。 修饰的荧光素酶蛋白包括一个或多个异源氨基酸序列，其中至少一个直接或间接与cAMP相互作用。

公开(公告)号：US20090305280A1

公开(公告)日：2009-12-10

申请号：US12454643

申请日：2009-05-19

申请人： Brock Binkowski ,  Lance P. Encell ,  Monika G. Wood ,  Keith V. Wood ,  Kris Zimmerman ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Pete Stecha

发明人： Brock Binkowski ,  Lance P. Encell ,  Monika G. Wood ,  Keith V. Wood ,  Kris Zimmerman ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Pete Stecha

IPC分类号： C12Q1/68 ,  C07H21/00 ,  C12N15/63 ,  C12N9/12 ,  C12Q1/66

CPC分类号： C12Q1/66 ,  C07K2319/20 ,  C07K2319/61 ,  C12N9/0004 ,  C12N9/0069 ,  C12Q1/008 ,  C12Q1/6876 ,  C12Y113/12 ,  C12Y114/00 ,  G01N33/5735 ,  G01N33/74 ,  G01N2333/726 ,  G01N2333/90241

摘要： A modified luciferase protein which is a sensor for molecules including cAMP is provided. The modified luciferase protein includes one or more heterologous amino acid sequences, at least one of which directly or indirectly interacts with cAMP.

摘要翻译： 提供了一种修饰的荧光素酶蛋白，其是包括cAMP的分子的传感器。 修饰的荧光素酶蛋白包括一个或多个异源氨基酸序列，其中至少一个直接或间接与cAMP相互作用。

公开(公告)号：US20080145882A1

公开(公告)日：2008-06-19

申请号：US11978950

申请日：2007-10-30

申请人： Aldis Darzins ,  Lance P. Encell ,  Rachel Friedman Ohana ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood ,  Kris Zimmerman ,  Michael R. Slater ,  Kate Qin Zhao

发明人： Aldis Darzins ,  Lance P. Encell ,  Rachel Friedman Ohana ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood ,  Kris Zimmerman ,  Michael R. Slater ,  Kate Qin Zhao

IPC分类号： C12Q1/34 ,  C12N9/78 ,  C12N11/02 ,  C12N11/12 ,  C07H21/04 ,  C12N1/20

CPC分类号： C12N9/14 ,  C12N9/96 ,  C12N11/00 ,  C12Q1/34 ,  C12Y308/01 ,  G01N33/581

摘要： The invention provides a mutant hydrolase protein with enhanced kinetics and functional expression, as well as polynucleotides encoding the mutant proteins and methods of using the polynucleotides and mutant proteins.

摘要翻译： 本发明提供具有增强的动力学和功能表达的突变水解酶蛋白，以及编码突变蛋白的多核苷酸以及使用多核苷酸和突变蛋白的方法。

公开(公告)号：US20130302880A1

公开(公告)日：2013-11-14

申请号：US13863924

申请日：2013-04-16

申请人： Aldis Darzins ,  Lance P. Encell ,  Rachel Friedman Ohana ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood ,  Kris Zimmerman ,  Michael R. Slater ,  Kate Qin Zhao

发明人： Aldis Darzins ,  Lance P. Encell ,  Rachel Friedman Ohana ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood ,  Kris Zimmerman ,  Michael R. Slater ,  Kate Qin Zhao

IPC分类号： C12N9/14

CPC分类号： C12N9/14 ,  C12N9/96 ,  C12N11/00 ,  C12Q1/34 ,  C12Y308/01 ,  G01N33/581

摘要： The invention provides a mutant hydrolase protein with enhanced kinetics and functional expression, as well as polynucleotides encoding the mutant proteins and methods of using the polynucleotides and mutant proteins.

公开(公告)号：US08420367B2

公开(公告)日：2013-04-16

申请号：US11978950

申请日：2007-10-30

申请人： Aldis Darzins ,  Lance P. Encell ,  Rachel Friedman Ohana ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood ,  Kris Zimmerman ,  Michael R. Slater ,  Kate Qin Zhao

发明人： Aldis Darzins ,  Lance P. Encell ,  Rachel Friedman Ohana ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood ,  Kris Zimmerman ,  Michael R. Slater ,  Kate Qin Zhao

IPC分类号： C12N15/00 ,  C12N1/21 ,  C12N5/10 ,  C12P21/00 ,  C07H21/00 ,  C12N9/14

CPC分类号： C12N9/14 ,  C12N9/96 ,  C12N11/00 ,  C12Q1/34 ,  C12Y308/01 ,  G01N33/581

摘要： The invention provides a mutant hydrolase protein with enhanced kinetics and functional expression, as well as polynucleotides encoding the mutant proteins and methods of using the polynucleotides and mutant proteins.

摘要翻译： 本发明提供具有增强的动力学和功能表达的突变水解酶蛋白，以及编码突变蛋白的多核苷酸以及使用多核苷酸和突变蛋白的方法。

公开(公告)号：US08557970B2

公开(公告)日：2013-10-15

申请号：US12773002

申请日：2010-05-03

申请人： Lance P. Encell ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood ,  Mary Hall ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Kristopher Zimmerman

发明人： Lance P. Encell ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood ,  Mary Hall ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Kristopher Zimmerman

IPC分类号： C12N15/53 ,  C12N15/63 ,  C12N15/70 ,  C12N15/79 ,  C12N9/02

CPC分类号： C12Q1/66 ,  C12N9/0004

摘要： A polynucleotide encoding a modified luciferase polypeptide. The modified luciferase polypeptide has at least 60% amino acid sequence identity to a wild-type Oplophorus luciferase and includes at least one amino acid substitution at a position corresponding to an amino acid in a wild-type Oplophorus luciferase of SEQ ID NO:1. The modified luciferase polypeptide has at least one of enhanced luminescence, enhanced signal stability, and enhanced protein stability relative to the wild-type Oplophorus luciferase.

摘要翻译： 编码经修饰的萤光素酶多肽的多核苷酸。 修饰的荧光素酶多肽与野生型Oplophorus萤光素酶具有至少60％的氨基酸序列同一性，并且在对应于SEQ ID NO：1的野生型Oplophorus荧光素酶中的氨基酸的位置包括至少一个氨基酸取代。 修饰的荧光素酶多肽相对于野生型Oplophorus萤光素酶具有增强的发光，增强的信号稳定性和增强的蛋白质稳定性中的至少一种。

公开(公告)号：US20100281552A1

公开(公告)日：2010-11-04

申请号：US12773002

申请日：2010-05-03

申请人： Lance P. Encell ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood ,  Mary Hall ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Kristopher Zimmerman

发明人： Lance P. Encell ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood ,  Mary Hall ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Kristopher Zimmerman

IPC分类号： A01K67/027 ,  C07H21/00 ,  C12N15/63 ,  C12N5/10 ,  C12N9/02

CPC分类号： C12Q1/66 ,  C12N9/0004

摘要： A polynucleotide encoding a modified luciferase polypeptide. The modified luciferase polypeptide has at least 60% amino acid sequence identity to a wild-type Oplophorus luciferase and includes at least one amino acid substitution at a position corresponding to an amino acid in a wild-type Oplophorus luciferase of SEQ ID NO:1. The modified luciferase polypeptide has at least one of enhanced luminescence, enhanced signal stability, and enhanced protein stability relative to the wild-type Oplophorus luciferase.

摘要翻译： 编码经修饰的萤光素酶多肽的多核苷酸。 修饰的荧光素酶多肽与野生型Oplophorus萤光素酶具有至少60％的氨基酸序列同一性，并且在对应于SEQ ID NO：1的野生型Oplophorus荧光素酶中的氨基酸的位置包括至少一个氨基酸取代。 修饰的荧光素酶多肽相对于野生型Oplophorus萤光素酶具有增强的发光，增强的信号稳定性和增强的蛋白质稳定性中的至少一种。

公开(公告)号：US08669103B2

公开(公告)日：2014-03-11

申请号：US13287986

申请日：2011-11-02

申请人： Brock Binkowski ,  Lance P. Encell ,  Mary Hall ,  Matthew B. Robers ,  Michael R. Slater ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood

发明人： Brock Binkowski ,  Lance P. Encell ,  Mary Hall ,  Matthew B. Robers ,  Michael R. Slater ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood

IPC分类号： C12N5/00 ,  C12N1/20 ,  C12N15/00 ,  C07H21/04

CPC分类号： C12Q1/66 ,  A01K2217/072 ,  C07D487/04 ,  C12N9/0004 ,  C12N9/0069 ,  C12N15/52 ,  C12N2009/02 ,  C12Y113/12005 ,  C12Y113/12007

摘要： An isolated polynucleotide encoding a modified luciferase polypeptide and substrates. The OgLuc variant polypeptide has at least 60% amino acid sequence identity to SEQ ID NO: 1 and at least one amino acid substitution at a position corresponding to an amino acid in SEQ ID NO: 1. The OgLuc variant polypeptide has at least one of enhanced luminescence, enhanced signal stability, and enhanced protein stability relative to the corresponding polypeptide of the wild-type Oplophorus luciferase.

摘要翻译： 编码修饰的萤光素酶多肽和底物的分离的多核苷酸。 OgLuc变体多肽与SEQ ID NO：1具有至少60％的氨基酸序列同一性，并且在对应于SEQ ID NO：1中的氨基酸的位置具有至少一个氨基酸取代.OgLuc变体多肽具有至少一个 相对于野生型Oplophorus萤光素酶的相应多肽，增强的发光，增强的信号稳定性和增强的蛋白质稳定性。

公开(公告)号：US20120174242A1

公开(公告)日：2012-07-05

申请号：US13287986

申请日：2011-11-02

申请人： Brock Binkowski ,  Lance P. Encell ,  Mary Hall ,  Matthew B. Robers ,  Michael R. Slater ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood

发明人： Brock Binkowski ,  Lance P. Encell ,  Mary Hall ,  Matthew B. Robers ,  Michael R. Slater ,  Keith V. Wood ,  Monika G. Wood

IPC分类号： C12N9/02 ,  C12N15/63 ,  A01K67/027 ,  C12N5/10 ,  C12N1/21 ,  C12N1/15 ,  C12N1/19 ,  C12N15/53 ,  C12Q1/66

CPC分类号： C12Q1/66 ,  A01K2217/072 ,  C07D487/04 ,  C12N9/0004 ,  C12N9/0069 ,  C12N15/52 ,  C12N2009/02 ,  C12Y113/12005 ,  C12Y113/12007

摘要： An isolated polynucleotide encoding a modified luciferase polypeptide and substrates. The OgLuc variant polypeptide has at least 60% amino acid sequence identity to SEQ ID NO: 1 and at least one amino acid substitution at a position corresponding to an amino acid in SEQ ID NO: 1. The OgLuc variant polypeptide has at least one of enhanced luminescence, enhanced signal stability, and enhanced protein stability relative to the corresponding polypeptide of the wild-type Oplophorus luciferase.

摘要翻译： 编码修饰的萤光素酶多肽和底物的分离的多核苷酸。 OgLuc变体多肽与SEQ ID NO：1具有至少60％的氨基酸序列同一性，并且在对应于SEQ ID NO：1中的氨基酸的位置具有至少一个氨基酸取代.OgLuc变体多肽具有至少一个 相对于野生型Oplophorus萤光素酶的相应多肽，增强的发光，增强的信号稳定性和增强的蛋白质稳定性。

公开(公告)号：US08735559B2

公开(公告)日：2014-05-27

申请号：US13105648

申请日：2011-05-11

申请人： Brock Binkowski ,  Braeden Butler ,  Lance P. Encell ,  Frank Fan ,  Brad Hook ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Susan Wigdal ,  Kristopher Zimmerman

发明人： Brock Binkowski ,  Braeden Butler ,  Lance P. Encell ,  Frank Fan ,  Brad Hook ,  Paul Otto ,  Gediminas Vidugiris ,  Susan Wigdal ,  Kristopher Zimmerman

IPC分类号： C12N15/62 ,  C12N15/63 ,  C12N15/54 ,  C12N15/74 ,  C12N15/79

CPC分类号： A61K49/0045 ,  A01K67/0275 ,  A61K49/0013 ,  C12N9/0069 ,  C12Q1/37 ,  C12Q1/66 ,  C12Y113/12007

摘要： A polynucleotide encoding a biosensor polypeptide comprising a modified circularly-permuted thermostable luciferase and a linker linking the C-terminal portion of the thermostable luciferase to the N-terminal portion of the thermostable luciferase. The modified circularly-permuted thermostable luciferase is modified relative to a parental circularly-permuted thermostable luciferase. The linker contains a sensor region capable of interacting with a target molecule in a cell. The modified circularly-permuted thermostable luciferase has an enhanced response after interaction of the biosensor with the target molecule relative to the parental circularly-permuted thermostable luciferase in the presence of the target molecule. Alternatively, the modified circularly-permuted thermostable luciferase has an enhanced response after interaction of the biosensor with the target molecule relative to the modified circularly-permuted thermostable luciferase in the absence of the target molecule.

摘要翻译： 编码包含修饰的环状置换的热稳定性荧光素酶的生物传感器多肽的多核苷酸和将热稳定性荧光素酶的C末端部分连接到热稳定性萤光素酶的N末端部分的接头。 相对于亲本循环置换的热稳定性荧光素酶，修饰的环状置换的热稳定性荧光素酶被修饰。 接头包含能够与细胞中的靶分子相互作用的传感器区域。 经修饰的环状置换的热稳定荧光素酶在目标分子存在下相对于亲本循环置换的热稳定性荧光素酶在生物传感器与靶分子相互作用后具有增强的响应。 或者，修饰的环状置换的热稳定荧光素酶在生物传感器与目标分子相互作用后相对于在不存在目标分子的情况下相对于经修饰的环状置换的热稳定性荧光素酶具有增强的响应。