公开(公告)号：US20090035759A1

公开(公告)日：2009-02-05

申请号：US11837565

申请日：2007-08-13

申请人： James F. BROWN ,  Jonathan E. Silver

发明人： James F. BROWN ,  Jonathan E. Silver

IPC分类号： C12Q1/68 ,  C12M1/34

CPC分类号： C12Q1/6806 ,  B01J2219/00317 ,  B01J2219/00621 ,  B01J2219/00637 ,  B01J2219/00644 ,  B01J2219/00659 ,  B01J2219/00677 ,  B01J2219/00722 ,  B01L3/5027 ,  B01L3/5085 ,  B01L3/50851 ,  B01L3/5088 ,  B01L2200/06 ,  B01L2200/0642 ,  B01L2200/10 ,  B01L2200/16 ,  B01L2300/0636 ,  B01L2300/0819 ,  B01L2400/0409 ,  C07H21/00 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/686 ,  C40B60/14 ,  Y10S436/805 ,  Y10S436/809 ,  Y10T436/2575

摘要： A method comprises loading a sample portion into a sample chamber which comprises means for minimizing diffusion of the sample portion, subjecting the sample portion to an amplification step, and determining whether the sample portion contains at least one molecule of a target nucleic acid. If the sample portion contains a single molecule of the target nucleic acid, the sample portion would attain a detectable concentration of the target nucleic acid after a single round of amplification. Also, a microfluidic device comprising a sample portion and a sample chamber comprising means for minimizing diffusion of the sample portion. Also, a microfluidic device comprising a sample chamber and an amplification targeting reagent positioned in the first sample chamber.

摘要翻译： 一种方法包括将样品部分加载到样品室中，该样品室包括用于最小化样品部分扩散的装置，对样品部分进行扩增步骤，以及确定样品部分是否含有至少一个靶核酸分子。 如果样品部分含有单个靶核酸分子，则样品部分将在单次扩增后获得可检测的靶核酸浓度。 此外，微流体装置包括样品部分和样品室，其包括用于最小化样品部分的扩散的装置。 此外，微流体装置包括样品室和位于第一样品室中的扩增靶向试剂。

公开(公告)号：US20080171382A1

公开(公告)日：2008-07-17

申请号：US11837564

申请日：2007-08-13

申请人： James F. BROWN ,  Jonathan E. Silver

发明人： James F. BROWN ,  Jonathan E. Silver

IPC分类号： C12M1/00

CPC分类号： C12Q1/6806 ,  B01J2219/00317 ,  B01J2219/00621 ,  B01J2219/00637 ,  B01J2219/00644 ,  B01J2219/00659 ,  B01J2219/00677 ,  B01J2219/00722 ,  B01L3/5027 ,  B01L3/5085 ,  B01L3/50851 ,  B01L3/5088 ,  B01L2200/06 ,  B01L2200/0642 ,  B01L2200/10 ,  B01L2200/16 ,  B01L2300/0636 ,  B01L2300/0819 ,  B01L2400/0409 ,  C07H21/00 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/686 ,  C40B60/14 ,  Y10S436/805 ,  Y10S436/809 ,  Y10T436/2575

摘要： A microfluidic device comprising a first sample chamber and a first sample portion positioned in the first sample chamber. If the first sample portion contains a single molecule of a target nucleic acid, the first sample portion would attain a detectable concentration of the target nucleic acid after a single round of amplification. Also, a microfluidic device comprising a first sample chamber and at least one amplification targeting reagent positioned in the first sample chamber. If a sample portion which comprises at least a single molecule of a target nucleic acid is positioned in the first sample chamber, the sample portion would attain a detectable concentration of the target nucleic acid after a single round of amplification.

摘要翻译： 一种微流体装置，包括第一样品室和位于第一样品室中的第一样品部分。 如果第一样品部分含有单分子靶核酸，则第一样品部分将在单次扩增后获得可检测浓度的靶核酸。 此外，微流体装置包括第一样品室和位于第一样品室中的至少一个放大靶向试剂。 如果至少包含单个靶核酸分子的样品部分位于第一样品室中，则样品部分将在单次扩增后获得可检测的靶核酸浓度。

公开(公告)号：US08067159B2

公开(公告)日：2011-11-29

申请号：US11837600

申请日：2007-08-13

申请人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver

发明人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver

IPC分类号： G01N33/543

CPC分类号： C12Q1/6806 ,  B01J2219/00317 ,  B01J2219/00621 ,  B01J2219/00637 ,  B01J2219/00644 ,  B01J2219/00659 ,  B01J2219/00677 ,  B01J2219/00722 ,  B01L3/5027 ,  B01L3/5085 ,  B01L3/50851 ,  B01L3/5088 ,  B01L2200/06 ,  B01L2200/0642 ,  B01L2200/10 ,  B01L2200/16 ,  B01L2300/0636 ,  B01L2300/0819 ,  B01L2400/0409 ,  C07H21/00 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/686 ,  C40B60/14 ,  Y10S436/805 ,  Y10S436/809 ,  Y10T436/2575

摘要： A microfluidic device comprising a first surface portion and a first sample retaining element, which have differing affinities to a fluid, and a method comprising supplying a sample to such a device. In some embodiments, the differing affinity is a result of plasma, ion embedding, surface charging, chemical, optical, electronic and/or electromagnetic treatment. Also, a microfluidic device comprising at least one microcapillary device having a sample retaining element, at least one surface of which exhibits hydrophobicity, hydrophilicity, electromagnetic force exertion and electrostatic force exertion. Also, a microfluidic device comprising a first element having a hydrophilic pattern comprising at least a first sample retaining element. Also, a method comprising supplying a sample to a channel between a first element and a second element, and inducing in the first element at least one hydrophilic pattern by electrets or by internal or external electrodes to provide a charged surface.

摘要翻译： 一种微流体装置，包括与流体具有不同亲和性的第一表面部分和第一样品保持元件，以及包括将样品供应到这种装置的方法。 在一些实施方案中，不同的亲合力是等离子体，离子嵌入，表面充电，化学，光学，电子和/或电磁处理的结果。 此外，微流体装置包括至少一个具有样品保持元件的微毛细管装置，其至少一个表面具有疏水性，亲水性，电磁力消耗和静电力的作用。 此外，微流体装置包括具有至少第一样品保持元件的亲水图案的第一元件。 另外，一种方法包括将样品提供给第一元件和第二元件之间的通道，并且通过驻极体或内部或外部电极在第一元件中诱发至少一种亲水图案以提供带电表面。

公开(公告)号：US08859204B2

公开(公告)日：2014-10-14

申请号：US11837565

申请日：2007-08-13

申请人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver

发明人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver

IPC分类号： C12Q1/68 ,  C07H21/00 ,  B01L3/00 ,  C40B60/14

CPC分类号： C12Q1/6806 ,  B01J2219/00317 ,  B01J2219/00621 ,  B01J2219/00637 ,  B01J2219/00644 ,  B01J2219/00659 ,  B01J2219/00677 ,  B01J2219/00722 ,  B01L3/5027 ,  B01L3/5085 ,  B01L3/50851 ,  B01L3/5088 ,  B01L2200/06 ,  B01L2200/0642 ,  B01L2200/10 ,  B01L2200/16 ,  B01L2300/0636 ,  B01L2300/0819 ,  B01L2400/0409 ,  C07H21/00 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/686 ,  C40B60/14 ,  Y10S436/805 ,  Y10S436/809 ,  Y10T436/2575

摘要： A method comprises loading a sample portion into a sample chamber which comprises means for minimizing diffusion of the sample portion, subjecting the sample portion to an amplification step, and determining whether the sample portion contains at least one molecule of a target nucleic acid. If the sample portion contains a single molecule of the target nucleic acid, the sample portion would attain a detectable concentration of the target nucleic acid after a single round of amplification. Also, a microfluidic device comprising a sample portion and a sample chamber comprising means for minimizing diffusion of the sample portion. Also, a microfluidic device comprising a sample chamber and an amplification targeting reagent positioned in the first sample chamber.

摘要翻译： 一种方法包括将样品部分加载到样品室中，该样品室包括用于最小化样品部分扩散的装置，对样品部分进行扩增步骤，以及确定样品部分是否含有至少一个靶核酸分子。 如果样品部分含有单个靶核酸分子，则样品部分将在单次扩增后获得可检测的靶核酸浓度。 此外，微流体装置包括样品部分和样品室，其包括用于最小化样品部分的扩散的装置。 此外，微流体装置包括样品室和位于第一样品室中的扩增靶向试剂。

公开(公告)号：US20120301884A1

公开(公告)日：2012-11-29

申请号：US13572649

申请日：2012-08-11

申请人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver

发明人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver

IPC分类号： G01N21/64 ,  C12P19/34

CPC分类号： C12Q1/6806 ,  B01J2219/00317 ,  B01J2219/00621 ,  B01J2219/00637 ,  B01J2219/00644 ,  B01J2219/00659 ,  B01J2219/00677 ,  B01J2219/00722 ,  B01L3/5027 ,  B01L3/5085 ,  B01L3/50851 ,  B01L3/5088 ,  B01L2200/06 ,  B01L2200/0642 ,  B01L2200/10 ,  B01L2200/16 ,  B01L2300/0636 ,  B01L2300/0819 ,  B01L2400/0409 ,  C07H21/00 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/686 ,  C40B60/14 ,  Y10S436/805 ,  Y10S436/809 ,  Y10T436/2575

摘要： A method comprising subjecting one or more sample portion(s) to a single amplification step, thereby amplifying a single molecule in the sample portion to a detectable level, and, in some embodiments, then determining whether the sample portion contains at least one molecule of the target nucleic acid. In some embodiments, the sample portion is in a porous sample structure, or in a sample chamber which comprises means for minimizing diffusion of the sample portion, or in a sample chamber which is inside a microcapillary device, or in a sample retaining means.

摘要翻译： 一种方法，包括使一个或多个样品部分经受单个扩增步骤，从而将样品部分中的单个分子扩增至可检测水平，并且在一些实施方案中，然后确定样品部分是否含有至少一个 靶核酸。 在一些实施方案中，样品部分处于多孔样品结构中，或在样品室中，其包括用于最小化样品部分的扩散，或在微毛细管装置内的样品室或样品保持装置中的装置。

公开(公告)号：US08257925B2

公开(公告)日：2012-09-04

申请号：US13108959

申请日：2011-05-16

申请人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver

发明人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver

IPC分类号： G01N33/543

CPC分类号： C12Q1/6806 ,  B01J2219/00317 ,  B01J2219/00621 ,  B01J2219/00637 ,  B01J2219/00644 ,  B01J2219/00659 ,  B01J2219/00677 ,  B01J2219/00722 ,  B01L3/5027 ,  B01L3/5085 ,  B01L3/50851 ,  B01L3/5088 ,  B01L2200/06 ,  B01L2200/0642 ,  B01L2200/10 ,  B01L2200/16 ,  B01L2300/0636 ,  B01L2300/0819 ,  B01L2400/0409 ,  C07H21/00 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/686 ,  C40B60/14 ,  Y10S436/805 ,  Y10S436/809 ,  Y10T436/2575

摘要： A miniaturized assembly is provided whereby a fluid sample can be divided into a plurality of sample portions in retaining wells and the sample fluid can be displaced from open ends of the wells while simultaneously being sealed in the wells. A method of dividing a fluid sample using the assembly is also provided.

摘要翻译： 提供了一种小型化组件，其中流体样品可以在保留孔中分成多个样品部分，并且样品流体可以同时被密封在孔中而从孔的开口端移位。 还提供了使用组件分割流体样品的方法。

公开(公告)号：US08551698B2

公开(公告)日：2013-10-08

申请号：US11837608

申请日：2007-08-13

申请人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver

发明人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver

IPC分类号： C12Q1/68

CPC分类号： C12Q1/6806 ,  B01J2219/00317 ,  B01J2219/00621 ,  B01J2219/00637 ,  B01J2219/00644 ,  B01J2219/00659 ,  B01J2219/00677 ,  B01J2219/00722 ,  B01L3/5027 ,  B01L3/5085 ,  B01L3/50851 ,  B01L3/5088 ,  B01L2200/06 ,  B01L2200/0642 ,  B01L2200/10 ,  B01L2200/16 ,  B01L2300/0636 ,  B01L2300/0819 ,  B01L2400/0409 ,  C07H21/00 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/686 ,  C40B60/14 ,  Y10S436/805 ,  Y10S436/809 ,  Y10T436/2575

摘要： A method comprising loading a sample into a microfluidic device which comprises plural sample chambers, subdividing the sample into a plurality of sample portions, such that respective sample portions are positioned in each of a plurality of the sample chambers, and subjecting the sample portions loaded into the respective sample chambers to at least a first amplification step. Each of the sample chambers has a respective volume such that if a sample portion positioned in the sample chamber comprises at least one molecule of a target nucleic acid, the target nucleic acid would attain a detectable concentration in the sample chamber after a single round of amplification.

摘要翻译： 一种方法，包括将样品加载到包括多个样品室的微流体装置中，所述多个样品室将样品细分成多个样品部分，使得各个样品部分位于多个样品室中的每一个中，并将加载的样品部分 相应的样品室至少至少第一放大步骤。 每个样品室具有相应的体积，使得如果位于样品室中的样品部分包含至少一个靶核酸分子，则靶核酸将在单次放大后在样品室中获得可检测的浓度 。

公开(公告)号：US20080160525A1

公开(公告)日：2008-07-03

申请号：US11837559

申请日：2007-08-13

申请人： James F. BROWN ,  Jonathan E. Silver

发明人： James F. BROWN ,  Jonathan E. Silver

IPC分类号： C12Q1/68 ,  C40B50/06 ,  C12M1/00 ,  C40B60/12

CPC分类号： C12Q1/6806 ,  B01J2219/00317 ,  B01J2219/00621 ,  B01J2219/00637 ,  B01J2219/00644 ,  B01J2219/00659 ,  B01J2219/00677 ,  B01J2219/00722 ,  B01L3/5027 ,  B01L3/5085 ,  B01L3/50851 ,  B01L3/5088 ,  B01L2200/06 ,  B01L2200/0642 ,  B01L2200/10 ,  B01L2200/16 ,  B01L2300/0636 ,  B01L2300/0819 ,  B01L2400/0409 ,  C07H21/00 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/686 ,  C40B60/14 ,  Y10S436/805 ,  Y10S436/809 ,  Y10T436/2575

摘要： A method comprises loading a sample portion into a first porous structure, subjecting the sample portion to an amplification step, and determining whether the sample portion contains at least one molecule of a target nucleic acid. If the sample portion contains a single molecule of the target nucleic acid, the sample portion would attain a detectable concentration of the target nucleic acid after a single round of amplification. Also, a microfluidic device comprising a porous sample structure and a sample portion positioned in the porous sample structure. Also, a microfluidic device comprising a porous sample structure and an amplification targeting reagent positioned in the porous sample structure.

摘要翻译： 一种方法包括将样品部分加载到第一多孔结构中，对样品部分进行扩增步骤，以及确定样品部分是否含有至少一个靶核酸分子。 如果样品部分含有单个靶核酸分子，则样品部分将在单次扩增后获得可检测的靶核酸浓度。 此外，微流体装置包括多孔样品结构和位于多孔样品结构中的样品部分。 此外，微流体装置包括多孔样品结构和位于多孔样品结构中的扩增靶向试剂。

公开(公告)号：US06391559B1

公开(公告)日：2002-05-21

申请号：US09563714

申请日：2000-05-02

申请人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver ,  Olga V. Kalinina

发明人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver ,  Olga V. Kalinina

IPC分类号： G01N33543

CPC分类号： C12Q1/6806 ,  B01J2219/00317 ,  B01J2219/00621 ,  B01J2219/00637 ,  B01J2219/00644 ,  B01J2219/00659 ,  B01J2219/00677 ,  B01J2219/00722 ,  B01L3/5027 ,  B01L3/5085 ,  B01L3/50851 ,  B01L3/5088 ,  B01L2200/06 ,  B01L2200/0642 ,  B01L2200/10 ,  B01L2200/16 ,  B01L2300/0636 ,  B01L2300/0819 ,  B01L2400/0409 ,  C07H21/00 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/686 ,  C40B60/14 ,  Y10S436/805 ,  Y10S436/809 ,  Y10T436/2575

摘要： Methods of detecting and quantifying genomic nucliec acid molecule sequences are provided using the simultaneous amplification of a plurality of discrete nanoliter-sized samples. A miniaturized closed assembly is also provided for carrying out amplification of a nucleic acid molecule by polymerase chain reaction in multiple nanoliter-sized samples. Methods of filling miniaturized sample chambers are also provided as are methods for determining the number of template molecules in a sample by conducting replicate nucleic acid sequence amplification reactions on a set of terminally diluted samples and counting the number of positive amplification reactions. The methods can be used to detect a single starting nucleic acid target molecule.

摘要翻译： 使用多个离散的纳升尺寸样品的同时扩增来提供检测和定量基因组核酸酸分子序列的方法。 还提供了一种小型封闭装置，用于通过多个纳升尺寸样品中的聚合酶链反应来进行核酸分子的扩增。 还提供了填充小型化样品室的方法，通过在一组末端稀释的样品上进行重复核酸序列扩增反应并计数阳性扩增反应的数量来确定样品中模板分子数目的方法。 该方法可用于检测单个起始核酸靶分子。

公开(公告)号：US6143496A

公开(公告)日：2000-11-07

申请号：US838262

申请日：1997-04-17

申请人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver ,  Olga V. Kalinina

发明人： James F. Brown ,  Jonathan E. Silver ,  Olga V. Kalinina

IPC分类号： B01L3/00 ,  B81C99/00 ,  C40B60/14 ,  G01N33/543 ,  G01N33/68

CPC分类号： C12Q1/6806 ,  B01L3/5027 ,  B01L3/5085 ,  B01L3/50851 ,  B01L3/5088 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q1/686 ,  B01J2219/00317 ,  B01J2219/00621 ,  B01J2219/00637 ,  B01J2219/00644 ,  B01J2219/00659 ,  B01J2219/00677 ,  B01J2219/00722 ,  B01L2200/06 ,  B01L2200/0642 ,  B01L2200/10 ,  B01L2200/16 ,  B01L2300/0636 ,  B01L2300/0819 ,  B01L2400/0409 ,  C07H21/00 ,  C40B60/14 ,  Y10S436/805 ,  Y10S436/809 ,  Y10T436/2575

摘要： Methods of detecting and quantifying genomic nucleic acid molecule sequences are provided using the simultaneous amplification of a plurality of discrete nanoliter-sized samples. A miniaturized closed assembly is also provided for carrying out amplification of a nucleic acid molecule by polymerase chain reaction in multiple nanoliter-sized samples. Methods of filling miniaturized sample chambers are also provided as are methods for determining the number of template molecules in a sample by conducting replicate nucleic acid sequence amplification reactions on a set of terminally diluted samples and counting the number of positive amplification reactions. The methods can be used to detect a single starting nucleic acid target molecule.

摘要翻译： 使用多个离散的纳升尺寸样品的同时扩增来提供检测和定量基因组核酸分子序列的方法。 还提供了一种小型封闭装置，用于通过多个纳升尺寸样品中的聚合酶链反应来进行核酸分子的扩增。 还提供了填充小型化样品室的方法，通过在一组末端稀释的样品上进行重复核酸序列扩增反应并计数阳性扩增反应的数量来确定样品中模板分子数目的方法。 该方法可用于检测单个起始核酸靶分子。