用于猪CD163基因编辑的靶向sgRNA、修饰载体及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN107177595A

    公开(公告)日:2017-09-19

    申请号:CN201710424822.6

    申请日:2017-06-07

    申请人: 浙江大学

    发明人: 张坤 王少华

    摘要: 本发明提供了一种用于猪CD163基因编辑的靶向sgRNA、修饰载体及其制备方法和应用,涉及基因工程技术领域,本发明提供的sgRNA和基因修饰载体,特异性强,能够非常高效地通过CRISPR/Cas9n系统在细胞水平上对猪CD163基因进行编辑。本发明提供的抗蓝耳病猪的制备方法,破坏了蓝耳病病毒受体,除了对目的基因CD163进行编辑外不会引入其他任何外源基因,也不会对基因组上非CD163基因的区域进行非特异的编辑,遗传背景干净清晰,极大的减少了后期转基因安全评估的工作。利用本发明获得的抗蓝耳病的猪,在能够保证正常存活的同时,抵抗蓝耳病病毒的感染,极大的减少了养猪业因蓝耳病造成的经济损失。