一种酿酒酵母菌株高产乳酸乙酯的新途径及其应用

    公开(公告)号:CN108642095A

    公开(公告)日:2018-10-12

    申请号:CN201810477707.X

    申请日:2018-05-18

    摘要: 本发明属于生物工程技术领域,尤其是一种酿酒酵母菌株高产乳酸乙酯的新途径及其应用。通过将乳酸脱氢酶、丙酰辅酶A转移酶与醇酰基转移酶同时在酿酒酵母中异源表达来实现高产乳酸乙酯。在出发菌株中完全敲除丙酮酸脱羧酶,过表达乳酸脱氢酶,以获得一定L-乳酸产生能力的酵母菌株;选用强启动子TEF1过表达丙酰辅酶A转移酶及强启动子PGK1过表达醇酰基转移酶,以同宗配合的基因HO作为整合位点,增加一个丙酰辅酶A转移酶的拷贝数,获得乳酸乙酯显著提高的酵母菌株,其乳酸乙酯的产量达353.1mg/L,与出发菌株相比,异戊醇降低49.9%,苯乙醇降低59.2%,满足白酒相关领域对酵母的较高要求,具有广阔的应用前景。

    一种乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母及其构建方法

    公开(公告)号:CN104911118A

    公开(公告)日:2015-09-16

    申请号:CN201510369294.X

    申请日:2015-06-29

    申请人: 江南大学

    摘要: 本发明公开了一种乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母及其构建方法,属于微生物技术领域和分子生物学技术领域。本发明采用基因同源重组的方法将酿酒酵母编码PDC的基因PDC1,PDC5和PDC6敲除掉,在酿酒酵母中表达来源于人的LDH并用抗霉素A来阻断电子链传递,使得人源化的乳酸发酵来代替乙醇发酵来维持糖酵解的进行。本发明顺利实现了人的乳酸脱氢酶的异源表达。本发明得到的乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母能够表达人的乳酸脱氢酶,在酿酒酵母pdc1Δ pdc6Δ pdc5Δ三缺陷菌株中表达LDHA或LDHC,加入抗霉素A后,能够生长并检测到乳酸的产生。本发明的乳酸脱氢酶人源化酿酒酵母将可以作为一种潜在的筛选抗癌药物以及能够调节乳酸脱氢酶活性相关基因的工具。